如何判斷大腸桿菌的分離純化成功了?

2023-09-14 20:34:13 字數 3646 閱讀 1586

1樓:快樂鴨帶孩子

首先應該通過革蘭氏染色確定是否被芽胞桿菌汙染,用稀釋塗平板方法純化,必要時可再選也中加入少量的吐溫,37度培養,必要時可用曙紅亞甲藍培養基,這上面長出的大腸桿菌有金屬光澤,最後再次鏡檢單菌落。枯草芽孢桿菌是革蘭氏陽性菌,大腸桿菌是革蘭氏陰性菌。通過桿菌試紙可以明顯的分辨。

枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產生的枯草菌素、多粘菌素、制黴菌素、短桿菌肽等活性物質,這些活性物質對致病菌或內源**染的條件致病菌有明顯的抑制作用。

擴充套件資料:枯草芽孢桿菌具有孢子休眠期、生殖生長期兩個生長時期,枯草芽孢桿菌會在生長環境惡劣、營養物質缺乏等不適宜的環境下進入孢子休眠期,並且形成具有極強抗逆作用、在高溫、酸鹼等極性環境下亦可生存的芽胞,從而適應環境得以生存。一旦環境變得適宜生長、營養充足,芽胞會自動進入生殖生長期,芽胞重新生長為枯草芽孢桿菌。

2樓:呵呵的旅行日

1、首先肉毒梭狀桿菌是嚴格厭氧,厭氧培養條件很容易分離。其他菌將樣品重懸於水,做梯度稀釋,在普通的瓊脂培養基平板上做塗佈,能分離出單菌落 2、酵母是真菌類的,菌落特徵跟其他幾個細菌不一樣,比起細菌大而厚,濕潤,表面光滑,多數不透明,黏稠,菌落顏色單調,多數呈乳白色,少數紅色,個別黑色。酵母菌生長在固體培養基表面,容易用針挑起,菌落質地均勻,正、反面及**與邊緣的顏色一致。

3、顯微鏡觀察,酵母細胞很大,單個的,有出芽現象。細菌的細胞都很小。桿菌和球菌在顯微鏡下可以分辨開。

4、對細菌進行革蘭氏染色。葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、肉毒梭狀桿菌是陽性,大腸是陰性。 5、芽孢染色。

枯草芽孢桿菌、肉毒梭狀桿菌有芽孢。

3樓:淡泊人生

將分離純化的大腸桿菌稀釋塗佈培養,觀察有沒有雜菌菌落,這樣可判斷是否純化成功。

怎樣簡單的分離大腸桿菌酵母菌並提純

4樓:戶如樂

不是很明白你的意扒橋思,是指兩種菌的混合菌液嗎?步驟如下:

1、準備lb培養基平板和ypd培養基平板。

lb配方:胰化蛋白腖1% ,酵母提取物 ,nacl1% ,瓊脂粉2%.

ypd配方:酵母膏1% ,蛋白腖2% ,葡萄糖2% ,瓊脂粉2%.

2、用接種環蘸取菌液鎮此含分別在兩種平板上劃線。

3、培養:lb平板37℃培養,ypd平板28℃培養。

4、lb平板培養18小時後,肉眼可見較明顯的菌落。對各菌落進行塗片鏡檢,選取大腸桿菌菌落,接到lb液體培養基中繼續培養,然後在lb平板上再次劃線鏡檢挑取單菌落,基本上能得到純粹的大腸桿菌菌落了。

5、ypd平板培養24小時後,ypd平板28℃培養。

4、lb平板培養18小時後,肉眼可見較御笑明顯的菌落。對各菌落進行塗片鏡檢,選取酵母菌菌落,接到ypd液體培養基中繼續培養,然後在ypd平板上再次劃線鏡檢挑取單菌落,基本上能得到純粹的酵母菌菌落了。

大腸桿菌的純化分離中擴大培養的目的

5樓:聽風

主要目的是滿足大腸桿菌正常的生長需要(因為原來的培養基營養物質等條件畢竟有限)。

微生物生命活動過程中需要的化合物有碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水。有的化合物既是碳源又是氮源、能源。生長因子是微生物生長不可缺少的微量有機物,但不一定需要外界補充,有的微生物可以自身合成。

在提供上述幾種主要營養物質的基礎上,培養基還需要滿足微生物生長對ph、特殊營養物質以及氧氣的要求。

我們一般用lb液體培養基來擴大培養大腸桿菌,培養後可在lb固體培養基上劃線分離。以下為本實驗中培養基配置步驟:

1.稱量:準確稱取各成分。蛋白腖,酵母提取物,氯化鈉,加水50ml。配置lb固體培養基時還需加1g瓊脂。

2.溶化:加熱熔化,用蒸餾水定容到50ml。配置lb固體培養基時還需加瓊脂,整個過程不斷用玻棒攪拌,目的是防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂。

3.調ph:用1mol/l naoh溶液調節ph至偏鹼性。

4.滅菌:在兩個250ml的三角瓶中分別裝入50ml lb液體培養基和50ml lb固體培養基,加上棉塞。將培養皿用牛皮紙包好,放入滅菌鍋內,1kg壓力滅菌15min。

5.倒平板:滅菌後,待固體培養基冷卻至60℃左右時在酒精燈火焰附近操作進行。其過程是:

將滅過菌的培養皿放在火焰旁,右手拿裝有培養基的三角瓶,左手拔出棉塞;②右手拿三角瓶,使三角瓶的瓶口迅速通過火焰;③用左手將培養皿開啟一條稍大於三角瓶口的縫隙,右手將培養基倒入培養皿,立刻蓋上皿蓋;④待平板冷卻凝固後,將平板倒過來放置。

倒過來放置的目的是防止培養基冷卻過程中形成的水滴落到培養基表面。向培養皿中轉移已滅菌的培養基時,也不要把培養基沾在皿壁上。否則,空氣中雜菌會在這些粘附培養基上繁殖,並汙染皿內培養基。

如何進行致病性大腸桿菌的分離培養

6樓:匿名使用者

致病性大腸桿菌的普通的大腸桿菌其實在一般培養基上的菌落形態和生化反應是完全一樣的,因此目前分離致病性大腸桿菌的方法主要是通過血清凝集,簡而言之就是把樣品劃線接種在培養基上,挑取盡可能多的大腸桿菌菌落進行血清凝集而證實之。某些方法,比如免疫磁珠集菌法可以提高分離率。

分離培養與鑑定:糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液需先經肉湯增菌,再轉種血瓊脂平板。

其他標本可同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。37℃孵育18~24小時後,觀察菌落並塗片染色鏡檢。採用一系列生化反應進行鑑定。

腸致病性大腸桿菌須先作血清學定型試驗。必要時檢定腸黴毒素。

怎樣簡單的分離大腸桿菌酵母菌並提純

7樓:龍鷹騎士

培養基中新增青黴素可以將酵母菌從大腸桿菌中分離出來。

8樓:豆包

在培養基上加伊和-美藍,一短時間後,選擇有紫色金屬光澤的菌落繼續培養(該菌落就是大腸桿菌菌落)

如何分離純化自來水中的大腸桿菌

9樓:楊柳風

1.保持地方及廚房器皿清潔,並把垃圾妥為棄置。

2.保持雙手清潔,經常修剪指甲。

3、進食或處理食物前,應用肥皂及清水洗淨雙手,如察彎毀廁或更換尿片後亦應洗手。

4.食水應採用自來水,並最好煮沸後才飲用。

5.應從可靠的地方購買新鮮食物,不要光顧無牌小販。

6.避免進食鬧配高危食物,例如未經低溫消毒法處敗備理的牛奶,以及未熟透的漢堡扒、碎牛肉和其它肉類食品。

7.烹調食物時,應穿清潔、可洗滌的圍裙,並戴上帽子。

8.食物應徹底清洗。

9.易腐壞食物應用蓋蓋好,存放於雪櫃中。

10.生的食物及熟食,尤其是牛肉及牛的內臟,應分開處理和存放(雪櫃上層存放熟食,下層存放生的食物),避免交叉汙染。

11.雪櫃應定期清潔和融雪,溫度應保持於攝氏4度或以下。

12.若食物的所有部分均加熱至攝氏75度,便可消滅大腸桿菌o157 : h7;因此,碎牛肉及漢堡扒應徹底煮至攝氏75度達2至3分鐘,直至煮熟的肉完全轉為褐色,而肉汁亦變得清澈。

13.不要徒手處理熟食;如有需要,應戴上手套。

14.食物煮熟後應盡快食用。

15.如有需要保留吃剩的熟食,應該加以冷藏,並盡快食用。食用前應徹底翻熱。變質的食物應該棄掉。

**方法摺疊。

感染大腸桿菌o157 :h7的臨床治理方法主要屬支援性**。若患者出現腹瀉,補充失去的水份及電解質十分重要。

約50%有腎併發症的患者在出現急性症狀時需要特別**或輸血。可使用抗革蘭氏陰性菌細菌藥物,但部分藥物無效。

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什麼藥治大腸桿菌的,大腸桿菌該用什麼藥治療最佳

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