1樓:匿名使用者
最小殺菌bai濃度(mbc):殺死99.9%(降低du3個數量級)的供試微生物
zhi所需的最
dao低藥物濃度。內
在體外抗菌試驗中主容要是用來判斷導致細菌不生長的藥物濃度是抑菌還是殺菌,把抑菌濃度培養時不長菌的培養液換為普通培養液,看在抑菌濃度不長的菌在普通培養基中是否生長,如生長則為抑菌濃度,不生長則可能為殺菌濃度。
體內、體外環境的不同,口腔唾液裡還含有溶菌酶,免疫球蛋白等物質呢。
藥物體外抗菌試驗中如何判斷導致細菌不生長的藥物濃度是抑菌還是殺菌
2樓:雪割風信子
一般是先將待檢藥物先以合適的液體培養基在試管內進行連續稀釋,每管內再加入一定量的試驗菌液。培養後得到該藥物的mic。取mic終點以上未長菌的各管培養液分別移種於另外的普通無菌平板上,培養後凡平板上無菌生長的藥物最低濃度即為該管藥物的mbc,反之為mic。
3樓:匿名使用者
把抑菌濃度培養時不長菌的培養液換為普通培養液,看在抑菌濃度不長的菌在普通培養基中是否生長,如生長則為抑菌濃度,不生長則可能為殺菌濃度,mic小於mbc
藥物體外抗菌試驗(k-b法)的培養其為
4樓:匿名使用者
敏試驗的結果受到諸多因素的影響,如培養基、試紙片以及菌液的濃度等。
1、培養基
細菌敏試驗所用的培養基種類較多,多數情況下,採用who組織統一要求的m-h培養基,這種培養基中含有的低胸腺嘧啶是與磺胺類物競爭的物質,因此進行的敏試驗效果較好。此外,還有適量的ca2+、mg2+,在培養基中起到觸媒的作用。但是,有些細菌對培養基中的成分有特殊的要求,特殊的菌要用特殊的培養基才能進行敏試驗。
例如,流感嗜血桿菌的敏試驗培養基用htm瓊脂;淋球菌的敏試驗培養基用加5%羊血的巧克力m-h瓊脂;肺炎鏈球菌的敏實驗用m-h瓊脂加5%的脫纖維羊血培養基。培養基中還有適量的ca2+、mg2+,在培養基中起到溶酶的作用,其含量的變化,可影響氨基糖苷類和四環素對銅綠假單胞菌的試驗結果,含量過高,抑菌圈會變小,含量過低,抑菌圈會大得不可接受。
細菌敏試驗的培養基厚度大約為4mm,若培養基厚度大於4mm,會使細菌出現耐;若小於4mm,本應耐的易出現敏感。所以,試驗時一定不要把敏紙片放在**部位,而應均勻地排布在平皿周圍的培養基上。製作敏試驗的培養基用水,主要是ca2+、mg2+等礦物質離子,也在很大程度上影響著敏試驗的結果。
2、試紙片
試紙片材質的好壞,對物穩定性和活性有很大影響。加工敏試紙片的試紙一般是使用加厚型的濾紙,雜質少,對物儲存無太大影響。然而,臨床中很多用的是普通紙,被水浸潤後會呈鹼性,並且含有大量無機離子,因此使用普通紙加工的試紙片物有較大的影響。
敏紙片的ph值一般要求為中性,這樣才適合的活度。敏紙片的厚度要求大約1mm,這樣才有利於細菌的生長和物的擴散速度。敏紙片的直徑在6.
00~6.35mm之間,紙片的厚度和直徑大小都會影響敏試驗的結果。
含紙片的片間差和***壞是做敏試驗的關鍵。一些敏紙片買來時就有抑菌環偏大或偏小的問題,紙片之間又存在很大的片間差。因此,紙片在用前必須檢驗其片間差和準確度,只有都達到標準要求後才能使用。
同時要注意紙片的儲存,因為有的紙片,如青黴素類,在儲存中因為受潮溼環境的影響容易降低其物的活性。因此,紙片應放低溫下(-10°C)儲存,同時要避免潮溼,以保持抗菌物的活性。盛紙片小瓶自低溫處取出應在室溫平衡至少10min後再開啟,避免冷凝水影響效。
3、細菌
由於各種菌對物的敏感性不同,產生的抑菌環大小不同,如果菌種不純,試驗中所產生的抑菌環大小與該菌種在純培養狀態下產生的抑菌環大小存在較大的差異,影響判斷結果的準確性。因此需要對各種致病菌提純後,分別進行不同的敏試驗。敏試驗時,需要將提純後的菌種配製成一定濃度的菌液。
who組織制定的標準是要求菌液濃度在1.5億/ml左右。若菌液濃度過高,該菌會對所有物產生耐;反之,菌液濃度過低,該菌會對所有物均敏感。最精確的方法是使用分光光度計測定新鮮培養物菌懸液的吸光度,來確定菌液濃度。
國家細菌耐性監測網的**甲等,其微生物實驗室大多數用此法來確定敏試驗的菌液濃度。
敏試驗中要將菌液均勻地塗在培養基上,使細菌均勻分佈,這樣才能使試驗結果不會出現較大的偏差。塗菌後15min才能貼敏紙片。由於塗菌後,細菌要有一段時間的適應過程,但是時間不能過長,否則會使細菌產生耐。
貼敏紙片時,每取一種敏紙片必須燒一下鑷子口,避免敏紙片之間相互混淆,以提高敏的準確性。物殺滅細菌存在一定的量比,敏試驗培養基上細菌層越厚抑菌圈就越小,反之抑菌圈就越大。根據一種物抑菌圈的有無或者大小,只能判斷出該對細菌有沒有效果,但其敏感性的高低需要通過科學嚴謹的實驗來確定。
物的敏感程度需要根據敏試驗的結果,並結合以上因素做綜合分析,才能得出科學的結論,而片面地根據敏圈的大小來決定敏感與否,結果不夠準確。
綜上所述,造成敏試驗的結果可能與實際效果不符,對敏試驗要具體情況進行相應的分析,再根據物的代謝過程和原理綜合論證,敏試驗的指導意義還是很大的。而且上述因素並不是在我們臨床做敏試驗過程中都能遇到,對此,我們需要認真執行標準化的試驗方法,認真執行clsi質控要求,做好室內質控與室間質評,以提高試驗的準確性。嚴格控制敏試驗用培養基和敏紙片,做到保證質量。
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