1樓:匿名使用者
1 除非你帶上完整的啟動子和終止子.35s promter是啟動下游版gus基因的,而不是上游的序列
權.2 該質粒用來表達你的目的基因時,你必須將完整的基因(啟動子+cds+終止子)一起匯入到多克隆位點區;然後轉化植物後,你可以通過gus染色來檢測陽性苗.另外你還可以用mcs區的酶切位點加下游的ncoi 或bgl ii雙切,將35s啟動子置換成你所研究的啟動子,這是它主要的用途.
而目的基因序列是定的,因此每個目的基因也就只有幾種限制酶能與其匹配~因此人工質粒一般會配備一個有多種酶切位點的序列~保證能和目的基因共享相同的酶切位點~
2樓:魚骨頭
理論上可以插入任何基因!
pcambia 1301這個質粒的啟動子35s promter在多克隆酶切位點(mcs)的後面,我該把基因插入到哪個區段?
3樓:匿名使用者
1 不會表達,除非你帶上完整的啟動子和終止子。35s promter是啟動下游gus基因的,而不是上游的序列。
2 該質粒用來表達你的目的基因時,你必須將完整的基因(啟動子+cds+終止子)一起匯入到多克隆位點區;然後轉化植物後,你可以通過gus染色來檢測陽性苗。另外你還可以用mcs區的酶切位點加下游的ncoi 或bgl ii雙切,將35s啟動子置換成你所研究的啟動子,這是它主要的用途。
質粒有多個限制酶切點,便於目的基因的插入
4樓:匿名使用者
不是,一般質粒都有一段多克隆位點(由不同的限制性內切酶組成),這版一段上的酶權
切位點都是質粒中唯一的(確保目的片段插入處是唯一的),不同的質粒有不同的多克隆酶切位點區域。
因此你可以通過雙向酶切或單向酶切的方法,將您需要研究的一段目的片段插入到那兩個酶切位點之間(前提是目的片段兩端點上必須帶有相同的酶切位點),再進行後續的工作。
ps:如果是t載體質粒,那麼只要是taq酶擴增的pcr產物均可以直接連轉插入。
5樓:匿名使用者
質粒上的那些限制酶切位點是不會重複的。
你說的對啊,要是同一種就切成小段了內~
而目的基因序列是定的,因此每個目的基因也就只有幾種限制酶能與其匹配~因此人工質粒一般會配備一個有多種酶切位點的序列~保證能和目的基因共享相同的酶切位點~
這就是多個酶切位點有利於目的基因插入的原因啦~o(∩_∩)o
6樓:匿名使用者
是不同的內切酶的位點 給你看個圖吧 上面那些就是這個質粒上有哪些酶切位點
7樓:匿名使用者
限制酶切bai
位點是指能夠du被核算酶識別並切開的核算zhi序列,dao酶不同,酶切位回點也不同,質粒上有
答多個限制酶切位點,常用的商業化質粒擁有多個酶切位點,但每個酶切位點多是單獨的。所以每一個核酸酶僅能在質粒上切開一個缺口
8樓:小白不憤青
不是同一種,不同位點,限制性內切酶是不同的。
9樓:為愛消香殞碎
不是同一個限制酶切點,如果要把兩個質粒連起來才需要同一限制酶切點切開
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