1樓:【爆
來(in situ hybridization,ish)是分子生物自學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術,始於20世紀60年代。2023年美國耶魯大學的gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交,將該基因進行定位,與此同時buongiorno—nardelli和amaldi等(1970)相繼利用同位素標記核酸探針進行了細胞或組織的基因定位,從而創造了原位雜交技術。自此以後,由於分子生物學技術的迅猛發展,特別是20世紀70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體dna的構建成功,為原位雜交技術的發展奠定了深厚的技術基礎。
原位雜交技術的原位雜交的基本原理
2樓:哈比
原位雜交技術的基本原理是利用
核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測dna或rna互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000) 。
rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或rna原位雜交。該技術是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:
在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的rna核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。rna原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低丰度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
染色體原位雜交技術有哪些方面的應用
3樓:匿名使用者
染色體原位雜交作為一種直接、快速、有效的基因定位技術最早是由pardue等於2023年報道的。當時採用小鼠隨體dna為模板,利用氚標記的核苷酸在體外轉錄合成rna
原位雜交技術的原位雜交技術分類
4樓:手機使用者
原位pcr技術是常規的原位雜交技術與pcr技術的有機結合,即通過pcr技術對靶核酸序列在染色體上或組織細胞內進行原位擴增使其拷貝數增加,然後通過原位雜交技術進行檢測,從而對靶核酸序列進行定性、定位和定量分析。原位pcr技術大大提高了原位雜交技術的靈敏度和專一性,可用於低拷貝甚至單拷貝的基因定位,為原位雜交技術的發展提供了更廣闊的發展前景。
原位雜交技術因其高度的靈敏性和準確性而日益受到許多科研工作者的歡迎,並廣泛應用到基因定位、性別鑑定和基因圖譜的構建等研究領域。目前原位雜交技術在植物中的應用比較廣泛,例如在棉花、麥類和樹木等的遺傳育種方面取得了顯著的成就,在畜牧上原位雜交技術主要用於基因定位和基因圖譜的構建以及轉基因的檢測和性別鑑定等方面。在水產方面,原位雜交技術則主要應用於基因定位(多見於對魚類和貝類等水生物的研究)和病毒的檢測(多見於蝦類)。
此外,原位雜交技術做為染色體高分辨顯帶技術的補充和發展,在水生物的細胞遺傳學的研究領域將發揮更重要的作用。同其他的生物技術一樣,原位雜交技術在其發展與應用的過程中會出現一些問題,但隨著原位雜交技術的不斷改進與完善以及檢測手段的改進,原位雜交技術的優越性越來越突出,其應用也會更加廣泛。
原位雜交具有哪些特點
5樓:艾康生物
您好!具有安全、快速、靈敏度高、特異性好,探針能長期儲存、能同時顯示多種顏色等優點,不但能顯示中期**相,還能顯示於間期核
病理科的原位雜交技術,有個cish是什麼
6樓:匿名使用者
指的是色素原位雜交(chromogenicin situ hybridization)
原理:將癌基因探針用地高辛或生物素標記,利用過氧化物酶或鹼性磷酸酶的反應使在光學顯微鏡下檢測石蠟組織mrna的表達水平。
具體可以看參考資料
原位雜交的基本定義
7樓:溫柔_654蕎
原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。
使用dna或者rna探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。
rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或rna原位雜交。該技術是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:
在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的rna核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。rna原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低丰度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
fish是原位雜交技術大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被髮明,現已從實驗室逐步進入臨床診斷領域。基本原理是熒游標記的核酸探針在變性後與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光訊號可在不改變被分析物件(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。dna熒游標記探針是其中最常用的一類核酸探針。
利用此探針可對組織、細胞或染色體中的dna進行染色體及基因水平 的分析。熒游標記探針不對環境構成汙染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導致的週期過程和技術障礙。
原位雜交技術和免疫細胞化學技術的聯絡與區別
原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列，將有放射性或非放專射性的外源屬核酸 即探針 與組織 細胞或染色體上待測dna或rna互補配對，結合成專一的核酸雜交分子，經一定的檢測手段將待測核酸在組織 細胞或染色體上的位置顯示出來。免疫細胞化學是用標記的特異性抗體 或抗原 對組織內抗原...
熒光原位雜交與免疫熒光有什麼區別
熒光原位雜交與免疫熒光的區別 原位雜交是從分子水平檢測，免疫熒光是從蛋白水平檢測。免疫熒光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法，使用熒光素標記探針，以檢測探針和 中期的染色體或 間期的染色質的雜交。熒光原位雜交的原理 fish fluorescen...
植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術有什麼不同
植物體細bai 胞雜交要首先去du掉細胞壁，而動物細胞zhi不用植物dao細胞沒有用胰蛋白酶，回而動物細胞要用胰蛋答白酶植物細胞有再生細胞壁過程，動物細胞沒有 植物細胞融合誘導方法有物理和化學方法 而動物細胞誘導融合有物理化學和生物方法 植物體細胞雜交能最後形成個體，而動物細胞融合能形成細胞系，並不...