1樓：半寂蓮燈
pcr反應需要加鎂離子，並且鎂離子濃度的總量應該比dntps的濃度高，常用1.5mmol/l。
鎂離子是加在pcr反應的緩衝液中的，成分是最複雜的，除水外一般包括四個有效成分：
1、緩衝體系，一般使用hepes或mops緩衝體系；
2、一價陽離子，一般採用鉀離子，但在特殊情況下也可使用銨根離子；
3、二價陽離子，即鎂離子，根據反應體系確定，除特殊情況外不需調整；
4、輔助成分，常見的有dmso、甘油等，主要用來保持酶的活性和幫助dna解除纏繞結構。
緩衝液的目的是提供合適的酸鹼度與某些離子，而pcr反應五要素是：引物(pcr引物為dn**段，細胞內dna複製的引物為一段rna鏈）、酶、dntp、模板和緩衝液（其中需要mg2+）。
標準的pcr過程：
1、dna變性
在90℃-96℃下，雙鏈dna模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈dna；
2、退火
在60℃-65℃下，系統溫度降低，引物與dna模板結合，形成區域性雙鏈；
3、延伸
在70℃-75℃下，在taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dntp為原料，從引物的3′端開始以從5′→3′端的方向延伸，合成與模板互補的dna鏈。
每一迴圈經過變性、退火和延伸，dna含量即增加一倍。現在有些pcr因為擴增區很短，即使taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內複製完成，因此可以改為兩步法，即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行，以減少一次升降溫過程，提高了反應速度。
2樓：北京索萊寶科技****
pcr的五大要素裡其中一個就是鎂離子,
一般來說，mg離子會對taq酶有啟用作用，會促進dna的合成，因為合成dna的時候，核苷酸進入聚合酶的活性中心也需要鎂離子來消除dna骨架上磷酸基團的負電荷，所以完全沒有mg離子是不太可能擴增好pcr的。一般來說，提高mg離子的濃度會增加pcr擴增的效率。但是，mg離子加多了之後，容易造成taq酶擴增的特異性降低，所以控制好mg離子的濃度對pcr來說還是很關鍵的。
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