1樓：black鄭
標曲是每次都要做的。因為儀器自身的效能會影響到標曲的。內
看樣品的穩定性之類的因素容。碰上在溶液中放一年也不是不會變的。
如果是碰上生物樣品的話，還在是每次做含量測定前，就要老老實實的做一下標曲。
標準曲線法，也稱外標法或直接比較法，是一種簡便、快速的定量方法。與分光光度分析中的標準曲線法相似，首先用欲測組分的標準樣品繪製標準曲線。
用標準樣品配製成不同濃度的標準系列，在與待測組分相同的色譜條件下，等體積準確進樣，測量各峰的峰面積或峰高，用峰面積或峰高對樣品濃度繪製標準曲線，此標準曲線應是通過原點的直線。若標準曲線不通過原點，則說明存在系統誤差。標準曲線的斜率即為絕對校正因子。
在測定樣品中的組分含量時，要用與繪製標準曲線完全相同的色譜條件作出色譜圖，測量色譜峰面積或峰高，然後根據峰面積和峰高在標準曲線上直接查出注入色譜柱中樣品組分的濃度。
2樓：文豫逸子
用標來準曲線法及標準管源
法測定物質含量方法bai如下：
1、標du曲必須每次都得做。因zhi為儀器自身的性dao能會影響到標曲的。
2、得看樣品的穩定性之類的因素。碰上在溶液中放一年也不變化的，3、碰上生物樣品的話，還在是每次做含量測定前，老老實實的做一下標曲。
3樓：匿名使用者
標準曲線法就是配製一系列標準溶液，檢測後以濃度為橫座標，以檢測值為縱座標繪製
版曲線。查試樣的檢測值權在標準曲線上對應的濃度。此為標準曲線法。
標準管法就是配製一系列標準溶液並進行顯色。試樣加入顯色劑後的顏色與標準管的顏色對比來得出試樣的濃度。
如何用標準曲線法測定物質含量
國家標準檢測蛋白質含量測定方法
4樓：匿名使用者
蛋白質含量測定方法就是檢測n元素的含量，像三聚氰胺的問題，就是通過增加n的含量使「蛋白質」含量提高的。
國家標準檢測蛋白質含量的方法叫做凱氏定氮法，食物中的蛋白質在催化加熱條件下分解，導致氨和硫酸結合產生硫酸銨。 鹼蒸餾採用無硫，硼酸吸收，用硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定，根據酸耗計算氮含量，再乘以轉化係數，即蛋白質含量。
具體操作步驟如下：
1.樣品處理
精確稱量0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸收10-20ml液體樣品（約30-40mg氮當量）。
將其轉移至乾燥的100毫升或500毫升氮氣固定瓶中，加入0.2克硫酸銅，6克硫酸鉀和20毫升硫酸，輕輕搖動，在瓶口放置一個小漏斗，將瓶子傾斜石棉網上有45度角，有小孔。
加熱小火後，內容物碳化，泡沫完全停止，加強火力，保持瓶內液體稍微沸騰，直至液體呈藍綠色澄清透明，然後繼續加熱0.5小時。取出並冷卻，小心加入20毫升水，冷卻，移入100毫升容量瓶中，用少量水洗淨氮氣瓶，洗淨液放入容量瓶中，然後用水沖洗至刻度，混勻備用。
取相同量的硫酸銅，硫酸鉀和濃硫酸作為試劑進行空白試驗。然而，這種方法很危險，很難在實驗室中證明。大多數實驗室都有一個消化器，可以一次處理16個以上的樣品和一個可以自行設定溫度的呼吸機。
它更安全，更可操作。
2.裝好定氮裝置
根據附圖安裝氮固定裝置。 在約2/3的水蒸氣發生器中加入幾滴甲基紅指示劑和幾毫升硫酸以保持水呈酸性。 新增幾個玻璃珠以防止突然沸騰。 蒸汽發生瓶中的水由壓力調節器加熱。
3.向接收瓶內加入試劑
將10ml 2％硼酸溶液和一滴混合指示劑加入到接收瓶中，並將冷凝管的下端插入液麵下。將10.0ml樣品消化液從小玻璃吸收到反應室中，用10ml水洗滌小燒杯以流入反應室，並擰緊小玻璃棒玻璃塞。
將10ml 40％氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯中，抬起玻璃塞使其緩慢流入反應室，不能立即將玻璃蓋塞緊，這樣容易使玻璃塞粘在樣品入口處，應先用蒸餾水清洗然後蓋上，並在小玻璃杯中加水以防止洩漏。
夾緊螺旋夾並開始蒸餾。蒸汽進入反應室，氨通過冷凝管進入接收瓶。蒸餾持續5分鐘。
移動接收瓶，使冷凝管的下端離開液體容器，然後蒸餾1分鐘，然後用少量水沖洗冷凝管下端的外端。取下接收瓶，將其置於0.05n硫酸或0.
05n鹽酸標準溶液中，以灰色或藍紫色為目的地。
擴充套件資料
除了凱氏定氮法以外，標準的測量方法還有：
分光光度法
食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解，分解產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨，在ph4.8的乙酸鈉-乙酸緩衝溶液中與乙醯丙酮和甲醛反應生成黃色的3,5-二乙醯-2,6-二甲基-1,4-二氫化吡啶化合物。在波長400nm 下測定吸光度值，與標準系列比較定量,結果乘以換算係數，即為蛋白質含量。
燃燒法樣品在900~1200℃下燃燒。在燃燒過程中，產生混合氣體。 諸如碳，硫和鹽的干擾氣體被吸收管吸收，氮氧化物被還原成氮。 形成的氮氣流由熱導檢測器（tcd）檢測。
5樓：life大林子
蛋白質含量測定主要有五
種方法,分別是凱式定氮法、雙縮脲法、紫外吸收法、酚試劑法和考馬斯亮藍法。
1.凱氏定氮法：
蛋白質是含氮的化合物。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化,使蛋白質分解,產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨,留在消化液中,然後加鹼蒸餾使氨遊離,用硼酸吸收後,再用鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量來乘以蛋白質換算係數,即得蛋白質含量。因為食品中除蛋白質外,還含有其它含氮物質,所以此蛋白質稱為粗蛋白。
2.雙縮脲定氮法：
在強鹼性溶液中,雙縮脲與cuso4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應。凡具有兩個醯胺基或兩個直接連線的肽鍵,或能過一箇中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應。紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。
測定範圍為1~10mg蛋白質。干擾這一測定的物質主要有:硫酸銨、tris緩衝液和某些氨基酸等。
3.紫外吸收定氮法：
蛋白質分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,使蛋白質具有吸收紫外光的性質。形成顏色產物的量取決於蛋白質的濃度。實際測定時,必須預先用標準蛋白質溶液製作一個標準校正曲線,通常用牛血清白蛋白水溶液做蛋白質標準溶液。
不同濃度的標準蛋白質溶液加入雙縮脲試劑後,反應生成的顏色產物用紫外-可見分光光度計在540nm 波長下測定吸光度,以雙縮脲試劑加緩衝或水作空白對照。然後將測得的值分別對蛋白濃度(mg/ ml) 作圖,得標準曲線。
未知蛋白樣品用雙縮脲試劑做同樣處理,根據測得吸光度值在標準曲線上直接查得未知蛋白質樣品中得蛋白質濃度。進行紫外吸收法測定時,由於蛋白質吸收高峰常因ph的改變而有變化,因此要注意溶液的ph值,測定樣品時的ph要與測定標準曲線的ph相一致。
4.酚試劑法：
此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即folin —酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:
①在鹼性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成複合物。
②folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產生深藍色(鉬蘭和鎢蘭的混合物)。在一定的條件下,藍色深度與蛋白的量成正比。
5.考馬斯亮藍法：
考馬斯亮蘭g-250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰的位置(λmax),由465nm變為595nm,溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。經研究認為,染料主要是與蛋白質中的鹼性氨基酸(特別是精氨酸)和芳香族氨基酸殘基相結合。在595nm下測定的吸光度值a595,與蛋白質濃度成正比。
擴充套件資料
檢查過程
(1) 標準法制定標準曲線 取14支試管，分兩組按下表a平行操作。 繪製標準曲線：以a595nm為縱座標，標準蛋白含量為橫座標，在座標紙上繪製標準曲線。
(2) 微量法制定標準曲線 取12支試管，分兩組按下表b平行操作。 繪製標準曲線：以a595nm為縱座標，標準蛋白含量為橫座標，在座標紙上繪製標準曲線。
(3) 未知樣品蛋白質濃度測定 測定方法同上，取合適的未知樣品體積，使其測定值在標準曲線的直線範圍內。根據所測定的a595nm值，在標準曲線上查出其相當於標準蛋白的量，從而計算出未知樣品的蛋白質濃度(mg/ml)。
6樓：星空
國家標準檢測蛋白質含量測定方法是滴定法。
什麼是分光光度法的標準曲線繪製標準曲線的意義何在
標準曲線是直接用標準溶液製作的曲線,是用來描述被測物質的濃度 或含量 在分析儀器響應訊號值之間定量關係的曲線。在分光光度法分析中,被測物質的濃度在儀器上的響應訊號值在一定範圍內呈直線關係,水樣測定的結果可以從標準曲線上查出。因此標準曲線製作的好壞,將會影響測定結果的準確度。1標準曲線的表示式標準曲線...
酚試劑分光光度法測空氣中甲醛。做標準曲線時，後面幾個高濃度吸光度偏低
後面幾個高濃度吸光度偏低，可能是波長選擇有較大誤差 因為最後一個管 2 g的，偏低，屬於正常現象 先檢驗儀器的波長準確性 波長精度 為什麼分光光度法能測定空氣中甲醛的含量 1 因為甲醛能和顯色劑發生顯色反應，在一定濃度和入射光的條件下，符合朗 伯比爾定律，所以可以用分光光度法定量甲醛的含量 2 測定...
曲線包括直線嗎，標準曲線法一定是直線嗎
無論是數理還是物理都不包括，但考試，必須按教科書上來答。說 曲線包括直線 其實就是為了掩蓋硬把 正6x2邊率說成是圓周率 正6x2邊形面積公式 r說成是圓面積公式7 d 3 正6x2邊形周長公式2 r說成是圓的周長公式d 6 2 3 3。這樣難免就會出現 理論脫離了實踐 數理脫離了物理。不過，這也給...