1樓:紫冰雨的季節
高效液相色使用方法:
1).過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜。
2).對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3).開啟hplc工作站(包括計算機軟體和色譜儀),連線好流動相管道,連線檢測系統。
4).進入hplc控制介面主選單,點選manual,進入手動選單。
5).有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual選單下,先點選purge,再點選
start,沖洗時速度不要超過10 ml/min.
6).調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點選injure,選用合適的流速,點選on,走基線,觀察基線的情況。
7).設計走樣方法。點選file,選取select users and methods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點選new method。選取需要的配件,
包括進樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完後,點選protocol。一個完整的走樣方法需要包括:
a.進樣前的穩流,一般2-5分鐘;
b.基線歸零;
c.進樣閥的loading-inject轉換;
d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。
8)進樣和進樣後操作。選定走樣方法,點選start。進樣,所有的樣品均需過濾。
方法走完後,點選postrun,可記錄資料和做標記等。全部樣品走完後,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩餘物。
9).關機時,先關計算機,再關液相色譜。
2樓:匿名使用者
高效液相色譜儀操作步驟: 1).過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜。 2).對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3).開啟hplc工作站(包括計算機軟體和色譜儀),連線好流動相管道,連線檢測系統。 4).進入hplc控制介面主選單,點選manual,進入手動選單。 5).有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。
沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual選單下,先點選purge,再點選start,沖洗時速度不要超過10 ml/min。 6).調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。
點選injure,選用合適的流速,點選on,走基線,觀察基線的情況。
7).設計走樣方法。點選file,選取select users and methods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點選new method。
選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完後,點選protocol。一個完整的走樣方法需要包括:
a.進樣前的穩流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.
進樣閥的loading-inject轉換;d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。 8).進樣和進樣後操作。
選定走樣方法,點選start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完後,點選postrun,可記錄資料和做標記等。
全部樣品走完後,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩餘物。 9).關機時,先關計算機,再關液相色譜。 10).填寫登記本,由負責人簽字。
高效液相色譜儀使用注意事項:
1、泵正常工作時,在流動相和流速不變的前提下柱壓應該是穩定的,當然在換流動相時壓力變化是正常的,正常情況下如果柱壓升高基本上都是由色譜柱使用時間長引起的(只有更換色譜柱),如果正常情況下壓力突然降低有可能是(1)接頭處有漏液的地方,採取的方法是有濾紙檢查,如有漏液的地方用扳手擰緊即可。如果沒有漏液則可能是(2)白色的管子裡面有氣泡從而導致流動相進不到泵裡面去,採取的方法是排氣泡排氣時:先stop停泵—開啟排氣閥—按purge(快衝)鍵—等氣泡排完後先stop停泵—擰緊排氣閥,其先後步驟不要搞反了。
2、泵正常工作時最高壓力最好不要超過200kg,所以開啟泵以後可以將泵的最大壓力調到200kg,這樣如果壓力超過上限則會自動報警停機,流速最好不用超過1ml/min,如果使用時壓力超過200kg,建議將流速調低點以降低壓力(在色譜柱正常的情況下),如果是因為色譜柱長時間使用造成壓力升高則建議更換色譜柱(因為色譜屬於耗材長時間使用就需要更換,更換的主要依據色譜柱出峰不正常或者柱壓力過高)。 3、泵正常工作時平均每15天左右向注油孔加潤滑油2~3滴。 4、流動相里面如果有鹽或酸類,做完實驗後要先用95%二次蒸餾水與5%甲醇洗色譜柱40分鐘左右,然後用純甲醇洗30分鐘左右才可以關機。
第二天如果繼續做實驗流動相里面仍舊有鹽或酸類,最好先用95%二次蒸餾水與5%甲醇過度20分鐘,再用流動相。如果流動相里面只有甲醇,水,乙腈。做完實驗後就不用95%二次蒸餾水5%甲醇沖洗,可直接用純甲醇洗30分鐘即可關機。
5、c18色譜柱的耐酸ph值範圍3—8使用時不要超出。 6、儀器長期不用時一定要將濾頭泡在甲醇裡半月開機一次,如果開機時泵抽不上液可以開啟排氣閥按purge快衝。 7、調反壓器時要注意等液體流出來以後才能調一般調8—10kg,比如現在泵顯示屏顯示柱壓50kg那再增加10kg顯示屏上顯示柱壓60kg然後擰緊鎖緊螺母。
8、色譜儀關機順序:清洗液路時可以把檢測器直接關機,清洗結束後先按stop讓泵停止後在關電源不允許直接關機。
液相色譜儀的使用步驟??
3樓:匿名使用者
1,流動相的過濾脫氣;
2,系統排氣,預熱;
3,走基線
4,建立方法,
5,分析樣品
6,分析處理資料
4樓:浩子是我男神
開機來順序:
1.檢查溶劑托盤自托盤上的溶劑是否
bai足量,以溶du劑液麵超過過輸zhi液管過濾頭dao5釐米以上為宜。
2.檢查輸液管內部有否氣泡,若有,應及時通過排液閥排出。
3.對溶劑(針對第1項看是否需要補充溶劑)和樣品進行處理,過濾,脫氣。
4.開啟主機電源,依次開啟檢測器,泵a,泵b,柱箱的電源5.開啟電腦,開啟色譜工作站
6.先在工作站中開啟活塞泵,以所需的流動相平衡系統(約需30min)7.開啟氘燈,等待系統基線走穩
8.開始進樣檢測
常見故障:
開機後壓力在一段時間逐漸變化(升高或降低),這往往是流動相在色譜柱內還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恆定。這些都不屬於儀器問題,只要多平衡一會就會穩定。若使用的是梯度程式,由於流動相的比例正處在變化中,壓力也會跟隨變化。
開機後壓力瞬間變化(>3mpa)。原因不外乎以下四種情況:⑴有氣泡;(2)漏液;(3)單向閥不良;(4)泵工作相位不正確,可逐個排除。
答案來自
液相色譜儀的原理及使用方法
5樓:匿名使用者
問題補充:希望能夠更加詳細些(例如:島津生產的紫外液相色譜的應用軟體的使用方法。)謝謝 一般分為普通的液相色譜和製備液相色譜兩種. 普通的液相色譜
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