1樓:檸檬
插入基因狹義來說只是目的基因,而標記基因是用來檢測的,廣義上也是插入的成分
關於基因表達載體的構建
2樓:我就是n動人
說說它們的作用吧
目的基因就是能夠產生
所需蛋白質的dn**段,比如抗蟲棉就是植入能產生抗蟲蛋白的目的基因。
啟動子、終止子:啟動子、終止子是目的基因dna上特殊排序的鹼基。rna從啟動子開始轉錄、翻譯,到終止子結束。
整個過程完成後便產生所需蛋白質。如果不清楚rna的轉錄翻譯過程,可以再細說。
標記基因:用於檢測是否已經植入目的基因。植入的成功率其實很低,所以有必要選出已經植入的個體。
比如抗蟲棉,判斷是否植入,用種植後讓蟲子吃的方法判斷週期太長。所以在目的基因前或後植入比如抗四環素基因(如果目的基因成功植入,抗四環素基因也一起植入),然後用四環素來淘汰植入失敗的個體,剩下的都是還有目的基因的個體。除了抗四環素基因,還有熒光基因等,總之就是方便檢測。
應該很詳細了吧。。。
3樓:裝子
北京鼎國生物提供載體構建實驗室課題服務,包括其它實驗室等課題服務,您可以諮詢下
關於基因表達載體
4樓:匿名使用者
基因工程的目的就是要讓一種生物的基因能夠在另外一種生物體內表達,所謂的表達就是要合成蛋白質,所以目的基因要在受體細胞中轉錄成mrna,再由mrna翻譯出蛋白質來。啟動子的作用就是啟動轉錄過程。你應該知道基因的表達是有選擇性的,比如胰島素基因只在胰島b細胞中表達,基因之所以只在特定細胞中表達就是由基因前的啟動子來調節的,所以構建的基因表達載體時,要在目的基因前加上能讓這個目的基因在受體細胞中表達的啟動子。
5樓:fu_娘子
當然要rna了。
首先,你要清楚。所謂【遺傳資訊】其實就是鹼基對的排列順序,也就是指dna分子的脫氧核苷酸的排列順序。
所謂【遺傳資訊的表達】就是dna通過轉錄作用,將其所攜帶的遺傳資訊(基因)傳給 mrna, 在三種 rna(mrna、trna和rrna)的共同作用下,完成蛋白質的合成。
而且,轉錄mrna還有翻譯過程是為了合成蛋白質。這一步是要在細胞核外進行的。dna在細胞核內,且是雙螺旋結構。
如果沒有mrna把遺傳資訊帶到核外,就只有擰成一股的dna,要怎麼合成蛋白質。
6樓:夢之翼
根據中心法則,想要基因成功表達,需要mrna,mrna是rna的一種,是轉錄翻譯必需。
如圖為基因表達載體的模式圖.下列有關基因工程中載體的說法錯誤的是( )a.基因工程的核心步驟是基
7樓:秋雨颯
a、基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建,a正確;
b、不同基因表達載體的構建過程不內一定相同,b錯誤;容c、啟動子位於基因編碼區的上游,是rna聚合酶識別和結合的部位,但不能叫起始密碼子,因為密碼子位於rna上,c錯誤;
d、抗生素抗性基因作為標記基因,用於鑑別受體細胞中是否匯入了目的基因,d正確.
故選:bc.
如何構建一個基因的過表達載體
8樓:風翼殘念
當拿到一個基因的dn**段後,就需要把它匯入一個載體,一方面長期儲存。另一方面也需要以載體為媒介將基因匯入受體細胞中。基因表達載體的構建是基因工程的核心。
常用的載體有細菌質粒,噬菌體和動植物病毒。其中質粒載體最常用。所謂載就是一個很長的環狀dna,攜帶一些基因,可以匯入細菌中自我複製,也可以從細菌中提取出來改造。
現在我們就需要把sun片段連到一個載體,用vectornti開啟,研究一下用哪個酶處理,這個載體需要用**a1這個酶切開,然後用sun連上,替換切下來的ccdb,這裡要用到兩個酶,一個**a1限制性內切酶切開,一個dna連線酶把新片段連上,植物轉基因載體和這些酶都是非常常用的試劑。
載體構建好之後需要把它們匯入大腸桿菌中複製,這裡就要用到大腸桿菌的感受態了,十把構建好的載體和感受態混合,然後放到42度熱水處理個1分鐘,再冰上放個3分鐘。
這時需要一些培養細菌的培養基來培養菌們,大腸桿菌這種菌很好養活,唯一需要注意的是,滅菌過後的培養基要小心儲存。把在冰上處理過的大腸桿菌放到培養基中培養一天,為了防止沒有轉入載體的菌也混進來,我們在載體上加入了一個抵抗抗生素的基因。
這樣我們在培養基中加入這種抗生素,在裡面就只有需要的大腸桿菌能生長了。最後得到了上億個攜帶著含有我們的sun基因的載體的大腸桿菌,這時就需要把質粒再提出來。
實驗室裡提質粒需要用專門的試劑盒,也可以簡化一下,先把菌液離心讓菌沉澱,然後再用水把菌打散,然後煮沸1分鐘再離心,取上清,上清中加乙醇讓dna析出,再離心讓dna沉澱,最後用水把dna溶解。這樣提出來的dna會有很多雜質以及細菌的基因組dna。
9樓:匿名使用者
用限制酶分別切割目的基因兩側及運載體,然後在dna連線酶的作用下就形成了基因表達載體。
10樓:紫耀星之軌跡
首先要用一定的限制酶切割質粒,使質粒出現一個缺口,露出黏性末端。然後用同
一種限制酶切斷目的基因,使其產生相同的黏性末端(部分限制性內切酶可切割出平末端,擁有相同效果)。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處,首先鹼基互補配對結合,兩個黏性末端吻合在一起,鹼基之間形成氫鍵,再加入適量dna連線酶,催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵,從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來,形成一個重組dna分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒dna分子結合,形成重組dna分子(也叫重組質粒)的。
完整的基因表達載體包括哪些
11樓:匿名使用者
基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟,而基因表達載體的本質是dna,組成元素有碳氫氧氮磷,其中氮在含氮鹼基中,磷在磷酸基團中
完整的表達載體必須包括:
1、複製子,在細菌中擴增時所必須.
2、啟動子,目的基因在細菌或細胞中轉錄所必須,轉錄了才能翻譯,是謂「表達」.
3、原核篩選標記,細菌增菌所必須.
4、真核篩選標記,如果是真核表達,就是必須的.
5、多克隆位點,即酶切位點,插入目的片段的區域.
6、其他所需構件,可視實驗設計情況而選用現成載體或在載體上自行新增.
另:表達的起始和終止,在目的基因上附帶起始密碼子和終止密碼子.
12樓:千耀化秋柔
啟動子:rna酶的結合部位
終止子:一段有特殊結構的dna短片段,轉錄結束的標誌目的基因:這個一定得有,不解釋
標記基因:共重組dna的鑑定和選擇
複製原點:dna複製起點,即dna聚合酶結合位點
基因表達譜篩選出差異表達基因後，應該如何來研究差異基因的功能
你這個表達差異肯定是做了不同的處理之後吧 所以這基因的功能肯定和這個處理誘導的結果相關啊 然後就過表達或者抑制該基因的表達 在細胞水平驗證表型是否正確 採用控制變數法，可以保持其他不變，讓研究物件變化，來發現你要研究的基因的功能的不同。基因表達差異 為什麼選2倍為標準 差異表達基因分析是根據表型協變...
關於基因突變，有關於基因突變
抗性植株與敏感型雜交，產生f1，f1為雜合子，f1自交產生f2，f2的表現型符合兩對雜合基因型的性狀分離比，即15 9 3 3 1，所以是兩個基因發生了突變。關於基因突變 你好錯誤在於 基因突變率很高 基因突變率在這裡指代不明或者特指 基因突變的頻率 基因突變的一大特點就是 低頻性 所以這句話是錯的...
構建基因表達載體時如何保證目的基因插入位置在啟動子與終止子之
你插入基因是需要用酶連作用的，載體質粒在設計的時候有多酶切位點，這個位點已經就是在啟動子和終止子之間的 通過選用相同且恰能分割啟動子和終止子的限制性核酸內切酶 即限制酶 作用於載體基因和目的基因。通過選用合適的限制性核酸內切酶 即限制酶 來使切割點在啟動子和終止子之間。構建基因表達載體啟動子和終止子...