構建基因表達載體時如何保證目的基因插入位置在啟動子與終止子之

2021-04-21 07:04:10 字數 3220 閱讀 6979

1樓:匿名使用者

你插入基因是需要用酶連作用的,載體質粒在設計的時候有多酶切位點,這個位點已經就是在啟動子和終止子之間的

2樓:匿名使用者

通過選用相同且恰能分割啟動子和終止子的限制性核酸內切酶(即限制酶),作用於載體基因和目的基因。

3樓:匿名使用者

通過選用合適的限制性核酸內切酶(即限制酶),來使切割點在啟動子和終止子之間。

構建基因表達載體啟動子和終止子如何插入?標記基因的**?

4樓:楊風遊

基因工程中bai,構建基

du因表達載體時

[ ]a.需要包含啟動子

zhi、終止子、標記

dao基因內、目的

基因等b.目的基因只能容從目的生物中獲取

c.啟動子將啟動表達載體的複製

d.剪下中形成的末端都可由t4dna連線酶連線ad

5樓:龍鈞嶽

首先作為載體使用的質粒是進行過人工修飾的,並非是自然條件的質粒直接使用,修飾過程就是新增標記基因、酶切位點的過程。啟動子與終止子應該是質粒上的,分別位於編碼區分上游與下游。

在構建基因表達載體時,除了要在重組dna中插入目的基因外,還要有啟動子,終止子還有什麼?

6樓:匿名使用者

事實上,載體上的各個部件類似工程中的各個功能模組,可以從分子生物版學知識中得出權。例如,載體需要複製,那必須有複製起點,若是表達載體,還需要有啟動子,終止子,上游調控原件等順式作用元件。此外,載體需要插入外源dna,故需要有多克隆酶切位點,成功表達載體的宿主需要被選擇出,所以需要有抗抗生素基因等選擇性標記基因。

啟動子和終止子之間加入一個目的基因,引起的插入突變一定會導致基因不能表達嗎?為什麼,恭請舉例說明

7樓:阿魯巴星人

這句話是錯的。copy

補充一下樓上說的

1.啟動子和終止子之間加入幾個鹼基:如果鹼基加在cds(編碼蛋白區)的兩端,或者內含子中,根本不影響蛋白編碼。

即使在cds,加入的鹼基為3的倍數,不影響編碼框,也不會對蛋白造成大的影響。

2.啟動子和終止子之間加入一個片段:也無所謂,如果加在utr區(就是cds兩端),或者內含子區,或者加入的片段是3的倍數,結果參照上一條。

3.啟動子和終止子之間加入一個目的基因:載體構建中,就是將目的基因插入啟動子和終止子之間,使得基因表達。

4.啟動子和終止子之間加入一個外源基因:在啟動子和終止子之間本身有基因的情況下,再加入外源基因,也是可以表達的,不過要看啟動子的強弱,強啟動子可以啟動多個基因,弱啟動子可能會不行。

不過兩個基因融合表達是常見的事兒。

5.啟動子與目的基因之間加入一個片段,可能會導致基因無法啟動,啟動子與目的基因之間的片段長短會影響到啟動子的啟動效果。商業化的載體上,都是將啟動子與多克隆位點之間調到了較好的位置。

6.啟動子和終止子之間加入一個目的基因而引起基因無法表達的原因有很多,最主要的幾個你參照以上5條反過來看就是。

8樓:匿名使用者

「加入一個目的基因」改為「加入一個目的片段」後,我再回答此問題。

不一定。如在內終止子前加一個容或多個三聯密碼子。大腸桿菌的pet系列質粒中,這種加入his-tag的事情是經常的,也不影響目的基因的表達。

為什麼基因工程中構建基因表達載體是插入啟動子和終止

9樓:匿名使用者

為什bai麼基因工程中構建基因表達du載體是zhi插入啟動子和終dao

止scrna:scrna(small cytoplasmic rna,細胞質版小權rna)主要位於細胞質內,種類較多,參與蛋白質的合成和運輸。srp顆粒就是一種由一個7srna和六種蛋白質組成的核糖核蛋白體顆粒,主要功能是識別訊號肽, 並將核糖體引導到內質網。

端體酶rna

端體酶rna(telomeraserna),它與染色體末端的複製有關。端體酶rna

反義rna

反義rna(antisenserna),它參與基因表達的調控。

上述各種rna分子均為轉錄的產物,mrna最後翻譯為蛋白質,而rrna、trna及snrna等並不攜帶翻譯為蛋白質的資訊,其終產物就是rna。

目的基因表達載體中,目的基因前後的啟動子、終止子的**和去向

10樓:匿名使用者

都是來自載體,一起進入細胞,開始表達,與基因本身無關

11樓:匿名使用者

啟動子終止子都是來自於載體的,目的基因就插在啟動子和終止子之間,啟動子是與rna聚合酶結合從而驅動轉錄的發生,而終止子是是轉錄停止,它們都是是目的基因在受體細胞中穩定存在並表達的。

12樓:匿名使用者

1 肯定都**於載體

復,如果是細菌

表制達,表達載體可以在細菌中自主複製;如果是真核表達,那麼應該是整個載體插入到染色體中。

2 目前來說,終止子就是一個密碼子,所有生物都通用,無所謂來自**,從操作來看,是你設計目的基因就加帶上的,不是載體中本來就有的。啟動子是用的載體中自帶的啟動子,但這個啟動子的序列可能**於大腸桿菌、酵母、人等等,這個序列的用哪個與以後選擇的宿主細胞有關,確保你的目的基因會在宿主細胞中能表達或高表達。

13樓:匿名使用者

啟動子有比較傳統的35s和gpd,現在gpd用的比較多,是已經公認的了。

至於不同物種的內gpd啟動子存在差異性,容如,a物種的gpd啟動子不一定能很好地作用於b物種,終止子一般用的構漕麴黴的終止子。

我也想做這方面的,啟動子克隆。

高中生物, 構建基因表達載體有標記基因,目的基因,啟動子終止子,到底有沒有複製原點呢?

14樓:水瓶火鍋呀

構建基因

bai表達載體

有標記基du因,目的基因zhi,啟動子dao終止子,有複製內原點。

解析:基因表容

達載體的組成包括:目的基因、啟動子、終止子、標記基因和複製原點。

1.啟動子位於基因的首端,是rna聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出mrna。

2.終止子:位於基因的尾端,終止轉錄。

3.複製原點:dna的複製有特定的起始位點。

15樓:葉葉滴滴

這個在填空題很少填唉

關於基因表達載體模式圖,關於基因表達載體的構建

插入基因狹義來說只是目的基因,而標記基因是用來檢測的,廣義上也是插入的成分 關於基因表達載體的構建 說說它們的作用吧 目的基因就是能夠產生 所需蛋白質的dn 段,比如抗蟲棉就是植入能產生抗蟲蛋白的目的基因。啟動子 終止子 啟動子 終止子是目的基因dna上特殊排序的鹼基。rna從啟動子開始轉錄 翻譯,...

目的基因與表達載體連線時有哪些要點

先看錶達載體有哪些合適的酶切位點,比如ndei,ncoi這樣識別序列有atg起始密碼子的,再看看目的基因含不含有這些位點,含有就不好連線了,挑好位點,計算下讀碼框是否正確,保證核糖體結合位點後的第一個atg與目的基因是間隔3的倍數個鹼基。下游的位點更好選,如果有6xhis標籤,想融合表達的話,就注意...

克隆載體與基因片段重組,與表達載體與基因片段重組,最後匯入動物體內,哪個更好呢

克隆載體主要是用來進行dna的重組 目的基因的分離和純化等等。而表達載體主要是進行目標基因的真核或者原核表達。兩種載體的用途不同各有優勢,如果你想要做蛋白的表達,那麼就選用表達載體比較好。克隆載體只是為了分離得到某個基因,表達載體是為了目的基因表達,各有實驗目的,用途不同,所以無法比較 您好,我還有...