1樓:匿名使用者
什麼時候要用兩種限制酶切了?把目的基因與載體切好後,聚合,會有目的-目的、載體-載體、目的-載體的基因,要的是目的載體的那一部分,然後就需要標記基因了
2樓:獨上江樓
目的基因和載體要用同一種限制性核酸內切酶切割,不然就沒法連了。用不同的限制酶切兩端,防止載體自連或目的基因自連。
基因工程中切割載體和含目的基因的dn**段是需使用同種限制酶是為什麼?是怎麼切割怎麼連的,能不能簡述
3樓:
所用的同種限制酶是限制性內切酶,也叫做內切酶,至於具體用哪個內切酶,要根據你要切的序列進行分析,分析的軟體很多,比如omiga,mega,primer premier......
至於怎麼切割怎麼連,下面已經說的很清楚了,簡說,就是識別-切割-連線。
基因工程的主要步驟:
1.目的片段的分離與合成,獲得目的片段
2.目的片段與載體連線(載體有兩種,一種叫做克隆載體,為了大量獲得該片段,並對在片段在基因層面進行研究;另一種叫做表達載體,為了將目的片段翻譯成蛋白,對蛋白進行研究);
3.含有目的片段的載體匯入宿主細胞內
4.對宿主進行檢測和篩選,主要檢測是否匯入成功,和匯入的基因是否你所要的;
4樓:真實
是用同種限制酶,讓他們的末端相同,鹼基配對
5樓:zy晨曦
限制性內切酶識別特定的酶切位點,作用於dna分子鏈上磷酸二酯鍵,同種限制酶才能切割出相同的粘性末端。連線時,相同的粘性末端通過鹼基互補配對,在dna連線酶的作用下形成磷酸二酯鍵。
基因工程的主要步驟:1、目的基因的獲得;2、目的基因與表達載體的連線;3、表達載體向宿主的轉化。
6樓:匿名使用者
這個是分子克隆最基本的原理,建議還是認真讀書,會了解得更透徹些。
目的基因和運載體不是應該用同種限制酶切割的嗎??為什麼這個題用不同種?
7樓:匿名使用者
目的基因和運載體copy不是應該用同種限制酶切割的
a、限制性內切酶能夠識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列,並且切割形成特定的粘性末端,a正確;
b、真核生物基因有編碼區和非編碼區之分,並且編碼區包括外顯子和內含子,而以蛋白質的氨基酸序列為依據合成的目的基因只包含外顯子,沒有內含子和非編碼序列,因此與原基因的鹼基序列不同,故b錯誤;
c、目的基因在受體細胞中成功表達才表示基因工程操作成功,僅僅檢測到受體細胞含有目的基因,並不代表該基因可以正常的轉錄和翻譯,故c錯誤;
d、質粒中抗生素抗性基因一般用於檢測目的基因是否成功匯入受體細胞中,故d錯誤.
在基因工程中,為什麼要用同一種限制性核酸內切酶切割
8樓:匿名使用者
一種限制性核酸內切酶只能識別一種特定的核苷酸序列,在基因工程中,只有用同種限制酶切出來的切口(兩端)才是相同的,這樣目的 基因與運載體 被切割出來的粘性末端的氫鍵才能互相配對並連在一起,然後才用dna連線酶將他們連線。
9樓:冰雨凝沫
同一種限制酶切割出來的黏性末端才會相同
基因工程裡,用兩種不同的限制酶一起切割質粒和含目的基因的dna,可以防止質粒和目的基因自身環化,那
10樓:棄療的梅大鳥
取下一段目的基因要切兩次,也就是說這裡切的兩次可以
分兩種不同的酶來切,同回樣的,載體也需要切兩次同樣也答是用這兩種酶來切,這樣有兩組鹼基的互補配對,就可以避免載體和載體配對以及目的基因和目的基因配對。(不太確定啊。。。。。)
11樓:
限制性內切bai酶識別特定的酶切位點,
du作zhi用於dna分子鏈上磷酸二酯dao鍵,同種限制酶才回能切割出相同的粘性答末端。連線時,相同的粘性末端通過鹼基互補配對,在dna連線酶的作用下形成磷酸二酯鍵。基因工程的主要步驟:
1、目的基因的獲得;2、目的基因與表達載體的連線;3、表達載體向宿主的轉化。
生物基因工程中用限制酶切割目的基因和運載體
12樓:蘇蘇
個人覺得用2種酶切不能完全避免錯誤連線,但可以降低50%的錯誤率,質粒多為環裝而不是線性,一般不會連線
13樓:匿名使用者
你說的這種情況不是不會出現,但與用同一種酶同時目的基因與運載體相比,個自相連的機會大大降低了,應該還是用不同的酶切要好一些。
生物:填空題:為什麼切割核苷酸序列要用同一種限制酶
14樓:北樂川
那本給答案的參考copy書 是高中的吧
高中教學 沒有分得這麼細緻 一般只提到粘性末端而且 既然你問道平末端 那摩應該是大學生了 至少是看了相關書籍吧你應該知道 分子生物學中 用同一種限制酶切割核苷酸序列 目的是將目的基因與載體連線 這時選用的限制性內切酶本身是隻會露出粘性末端的 並且這時需要的確實是要求載體與目的基因露出相同粘性末端以便於連線
15樓:匿名使用者
平末端也要用同一種型別的酶,得到相同的平末端。
只是題目主要強調酶的特異性。
16樓:lovely宸
平末端再怎麼連起來?
同一種限制酶產生的粘性末端是固定的,到時候2個粘性末端就可以再互補配對,用連線酶就可以連線了
17樓:浙大阿米巴
實際基因工程操作中很少會用平末端,因為平末端沒有特異性。
高中生物基因工程原理
18樓:2010巴布亞
它所謂專一性是指是被基因序列的專一性,目的基因和載體只要有他能識別的序列都可以切割,不會管你是什麼。專一性是體現在序列專一性,不是某種物質的專一性。載體上只是有可切割的基因,兩段可切割基因之間的才是想要的,你怎麼能保證這兩段之間就有想要的。
而目的基因的兩段可切割基因之間恰又想要的,所以才那樣。正好互補連結。自己畫圖看看就知道了。
好了。我只可全是自己碼的字,累啊。誰讓我當年生物學的太好了呢。
呵呵!把分數給我吧。
19樓:學無止境
正是限制酶具有專一性,所以才要用同一種限制酶。限制酶的專一性,指的是識別和切割特定的鹼基序列。目的基因和載體上有相同的限制酶識別序列(不是相同的基因),用同一種限制酶切割,才能產生相同的粘性末端,才能將目的基因與載體連線起來。
限制酶把目的基因切下來後,可以用連線酶將其與載體連線起來。
20樓:夜月神舞
用同一種酶切割目的基因和載體,是為了使目的基因和載體有一樣的平末端或粘性末端,才能進行互補配對;酶具有專一性,只能識別一種特定的鹼基序列,對其進行切割,載體上並無想要的基因,只有一些與目的基因相同的鹼基序列,這樣才為酶切割提供了基礎;把被酶切割下來的目的基因和載體放在一起,由於鹼基互補配對原則,就會進行互補配對,連線在一起.
21樓:高志邦學
同一種酶切割不同的dna產生的黏性末端能夠很好地進行鹼基配對 。匯入的不僅僅是載體還有目的基因 將目的基因與載體結合成為重組dna分子 在轉化到受體細胞中 在進行篩選重組細胞 實現功能表達 5步
22樓:卜夢巖
你好 關於第一個問題:基因是有遺傳效應的dn**段,所以基因是dna的一部分 現在我們切的是基因的上方和下方而不是基因本身,載體上是一種,而我們要的是另一種,(就是替換一下)
關於第二個問題:能不能再說明白點 :)
23樓:宰良
限制酶切割的是相鄰鹼基,為了確保目的基因匯入載體時順序一樣,必須用同一種酶。
通俗點,切割目的基因時,將一段切下,露出兩端,如果用同一種酶,就可以露出與原目的基因兩端相同的鹼基,達到配對,使目的基因的順序和位置正確。
連線用dna連線酶,作用和限制酶相反。限制酶像刀子,dna連線酶像縫補針。
基因工程當中,用相同的內切酶切割載體和目的基因是為了獲得相同還是互補的粘性末端
24樓:bie___汀
基因工程中,用相同的內切酶切割運載體和目的基因是為了獲得相同的也是互補的粘性末端。
25樓:清風攬月
應該是為了獲得相同的粘性末端,因為一般來說,一種限制性內切酶只識別一種特定的序列,所以它切下的應該是相同的粘性末端。
26樓:匿名使用者
和一個末端相同,和另一個末端就是互補
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