您好,我想問一下熒光定量PCR產物的溶解曲線的Tm值在92度可以嗎?是不是在86 88度之間最好?謝謝

2021-03-27 07:24:49 字數 2152 閱讀 9519

1樓:匿名使用者

這個不是絕對的,只是大多數rt-pcr產物的tm值會落在那個範圍內,有些目的片段很長的產物有可能會稍微大一點。這跟目的片段長度有關係。主要看產物是否為單一峰,是否有雜峰。

2樓:匿名使用者

92度時,dna雙鏈都接近變性溫度了呀。

tm值常在60~70度左右,可以通過熔接曲線看出來。

您好,我想問一下熒光定量pcr產物的溶解曲線中tm值在92度左右可以嗎?是不是在86-88度之間最好?謝謝

3樓:匿名使用者

這個是可以的。根據擴增產物gc含量的不同,tm有可能很高。只要解離曲線有一個很銳的峰,就沒有問題。我以前為了提高特異性,專門設計過高tm值的引物。

您好,我想問一下,熒光定量pcr的引物跨2個內含子可以嗎?因為我的基因的外顯子特別小!謝謝

4樓:

可以呀,跨內含子的引物還好一些呢。。。

5樓:滄海一粟

當然可以了,所跨內含子與pcr產物長度相差越大越好。

6樓:匿名使用者

可以啊,這沒什麼問題

熒光定量pcr熔解曲線的tm值不一致,峰值所在溫度不一,這是怎麼回事啊

7樓:清晨在雲端

熒光來,又作「螢光」,是自指一種光致發光bai的冷發光現象。當某種常溫du物質經某種波長的入射zhi光(通常是紫外線或daox射線)照射,吸收光能後進入激發態,並且立即退激發併發出比入射光的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);很多熒光物質一旦停止入射光,發光現象也隨之立即消失。

熒光定量pcrtm值代表啥意思

8樓:滿意請採納喲

tm值和溶解曲線是為了檢測pcr反應特異性的,

主峰前的一個小峰可能是非特異性擴增,

也可能是引物二聚體,可以降低引物濃度試試

老師,您好,有些問題想諮詢您,我不太明白實時熒光定量pcr溶解曲線的tm值是儀器自動給出的嗎,

9樓:有能註冊的名嗎

較好的溶解曲線應該只有目的片段單一的峰,如果在目的片段靠前的位置有小峰,可能是引物二聚體汙染,為什麼你的曲線什麼峰都沒有呢?

熒光染料定量pcr熔解曲線tm值過高對結果有什麼影響

10樓:誰說我不好哎

用syber green方法做完pcr後,用來判斷產物是否相對專一。反應結束後,逐漸加溫。和syber green分子結合的pcr產物

隨溫度升高逐漸變為單鏈,就不能在和syber green結合。一般每加溫一度,讀一次訊號。當溫度到達pcr產物的tm時,產物解離一下增多。

曲線的橫座標是溫度,而縱座標是熒光訊號的變化!開始加熱,訊號變化不大,所以幾乎是平的,接近tm時,突然變化加大,所以出現峰值。再升溫,產物全部解離,就又是一條直線了。

如果有非特異性產物,在加熱過程中就會出現一些比較矮,寬的峰。

實時定量pcr引物tm值和溶解曲線橫座標的tm是一回事麼? 5

11樓:手機使用者

不一樣的,引物的tm是引物本身的解鏈溫度,軟體一般會自動給出。溶解曲線橫座標的tm是pcr產物的解鏈溫度,所以一般是比引物本身的tm值大的。

12樓:匿名使用者

tm是當50%的引物和互補序列表現為雙鏈dna分子時的溫度。tm對於設定pcr退火溫度是必需的。

tm可採用下列公式計算:tm=2(a+t) + 4(g+c)。

13樓:匿名使用者

不是一回事,引物的tm值不等與反應時的tm值。反應時的tm值測量的應該是整個體系的。

實時pcr產物的tm值為什麼一般是在80以上

14樓:南京金益柏生物科技****

pcr的退火溫度是引物與模板之間的,而real time pcr最後的退火溫度是產物之間的。產物的tm值,指的是pcr產物解鏈一半時的溫度。一般realtime pcr 的產物大多在70-200bp之間。

當然退火溫度會在80以上了。

誰能具體解釋一下熒光定量PCR中溶解曲線的意思以及作用

用syber green方法做完pcr後,用來判斷產物是否相對專一。反應結束後,逐漸加溫。和syber green分子結合的pcr產物隨溫度升高逐漸變為單鏈,就不能在和syber green結合。一般每加溫一度,讀一次訊號。當溫度到達pcr產物的tm時,產物解離一下增多。曲線的橫座標是溫度,而縱座標...

幫看一下乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測報告

你的檢查結果顯示hbv dna 2.1 10 3次方 2100個病毒含量,屬於陽性,但也是屬於輕微的,肝功能正 版常和b超也正常,說明權病毒不是很強,這種情況是不需要 也不需要用藥,定期檢查就可以了,放心吧!2.1 10 3 2.1 10 10 10 2100,大於1000.是陽性bai,低度復du...

您好,我想問一下是否可以幫我鑑定一下紅木傢俱的木材及價格

看了你的紅木傢俱,材質應該是很 酸枝木或者是紅酸枝,由於燈光的緣故看的不是十分清楚,但是傾向於黑酸枝木,紅木傢俱風格是清式和 風格混雜,做工尤其是雕工不是很精,傢俱保養的不錯,有收藏價值,總體 我粗略地估計一下,按現在的 計算應該在50萬以上,僅供你參考。謝謝 想鑑定紅木傢俱找 本人買的紅木傢俱想鑑...