為什麼油鏡的放大倍數比普通物鏡大?2,單染色的原理是什麼

2021-03-28 22:43:56 字數 4711 閱讀 4825

1樓:匿名使用者

油鏡,光學顯微鏡之一,使用時,鏡頭浸入油中(通常是香柏油),用於觀察較細微的結構,是實驗室常用的顯微鏡之一,清晰度略高於普通光學顯微鏡,用於觀察衣原體,細菌,細胞器等.

油鏡的透鏡很小,光線通過玻片與油鏡頭之間的空氣時,因介質密度不同,發生折射或全反射,使射入透鏡的光線減少,物象顯現不清.若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.

515),則使進入透鏡的光線增多,視野亮度增強,使物象明亮清晰.

由於細菌體積微小,故在細菌的形態學研究中,經常需要藉助顯微鏡油鏡,才能比較清楚地進行觀察.因此,必須熟練地掌握油鏡的使用及保**.

2樓:匿名使用者

微生物實驗中細菌在染色前需要固定的原因:

一:殺死細胞,是染料易於著色。

二:使細菌附著於玻片上,不易被水沖掉。

在固定時,是要慢慢晾乾,如果得確要加快速度,可以處於酒精燈火焰上部遠處稍微烘幾下,切忌烘得玻片升溫,否則有可能會破壞細菌生命形態

細菌的革蘭氏染色與顯微觀察

一、 實驗原理

革蘭氏染色原理:細菌對於革蘭氏染色的不同反應,是由於它們細胞壁的成分和結構不同造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結,當用乙醇處理時,由於脫水而引發網狀結構的孔徑變小,通透性降低,從而使結晶紫-碘的複合物不易被洗脫而保留在細胞內,經脫色和復染後仍保留初染劑的藍紫色。

革蘭氏陰性菌的細胞壁肽聚糖層較薄、類脂含量高,所以當脫色處理時,類脂質被乙醇(或丙酮)溶解,細胞壁透性增大,使結晶紫-碘的複合物比較容易被洗脫出來,用復染劑復染後,細胞被染上覆染劑的紅色。 顯微鏡成像原理:現代普通光學顯微鏡利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統來放大成像,故又常 被稱為複式顯微鏡。

顯微鏡的光學系統中,物鏡的效能最為關鍵,油鏡的放大倍數最大,對微生物學研究最為重要。在載玻片與鏡頭之間加滴鏡油主要是為了增加照明亮度和增加顯微鏡的解析度。以油代替空氣作為光的傳播介質,減少光線的折射或全反射,使觀察到的像更加清晰。

二、 實驗器材

1. 菌落:

大腸桿菌24h營養瓊脂斜面培養物、

金黃色葡萄球菌約24h營養瓊脂斜面培養物、 枯草芽孢桿菌12~18h營養瓊脂斜面培養物。

2. 溶液或試劑:

蒸餾水、碘液、結晶紫染色液、95%酒精、番紅染色液、香柏油。 3. 儀器:

顯微鏡、載玻片、接種環、酒精燈、鑷子、擦鏡紙。

三、 實驗步驟

革蘭氏染色:

1. 塗片

取出載玻片,點燃載玻片,燃盡載玻片上的酒精和滅菌,在中間輕輕點一小滴蒸餾水,用接種環在試管的斜面培養基上,輕輕挑取少量菌體,整個過程試管口都要處在酒精燈的上方,而且速度要快,以防汙染培養基。然後在載玻片的小水滴以轉圈的動作塗片,待水滴混濁後停住,等其乾燥、固定。

2. 初染

滴加結晶紫(以剛好將菌膜覆蓋為宜)於菌落上,染色1~2min ,傾去染色液,有細水從載玻片上方向下衝洗,至洗出液為無色,將載玻片上水甩淨。

3. 媒染

滴加碘液衝去殘水,並覆蓋約1min,水洗。

4. 脫色

將載玻片上面的水甩淨,將載玻片傾斜,在白色背景下,用滴管加95%的酒精脫色,直至流出的酒精剛好不出現藍色,立即用水衝淨酒精,將載玻片上水甩淨。

5. 復染

用番紅液復染約1~2min,水洗,然後再吸水紙吸乾

6. 鏡檢:

在低倍鏡下尋找要觀察的細菌菌落(在不停地移動載玻片,若感覺到有紅色陰影,立刻停止,調整倍數,若不是菌落,繼續找),將鏡筒升高,然後轉換到油鏡。在樣品區域加滴香柏油,用粗調節器將鏡筒小心地降下,使油鏡浸在鏡油中並幾乎與標本相接。將聚光器升至最高位置並開足光圈,用粗調節器將鏡筒徐徐上升,直至視野中出現物像並用細調節器使其清晰準焦為止。

細菌革蘭氏染色法鏡檢中滴加香柏油為什麼可以碰到100倍鏡

3樓:匿名使用者

微生物實驗中細菌在染色前需要固定的原因:

一:殺死細胞,是染料易於著色。

二:使細菌附著於玻片上,不易被水沖掉。

在固定時,是要慢慢晾乾,如果得確要加快速度,可以處於酒精燈火焰上部遠處稍微烘幾下,切忌烘得玻片升溫,否則有可能會破壞細菌生命形態

細菌的革蘭氏染色與顯微觀察

一、 實驗原理

革蘭氏染色原理:細菌對於革蘭氏染色的不同反應,是由於它們細胞壁的成分和結構不同造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結,當用乙醇處理時,由於脫水而引發網狀結構的孔徑變小,通透性降低,從而使結晶紫-碘的複合物不易被洗脫而保留在細胞內,經脫色和復染後仍保留初染劑的藍紫色。

革蘭氏陰性菌的細胞壁肽聚糖層較薄、類脂含量高,所以當脫色處理時,類脂質被乙醇(或丙酮)溶解,細胞壁透性增大,使結晶紫-碘的複合物比較容易被洗脫出來,用復染劑復染後,細胞被染上覆染劑的紅色。 顯微鏡成像原理:現代普通光學顯微鏡利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統來放大成像,故又常 被稱為複式顯微鏡。

顯微鏡的光學系統中,物鏡的效能最為關鍵,油鏡的放大倍數最大,對微生物學研究最為重要。在載玻片與鏡頭之間加滴鏡油主要是為了增加照明亮度和增加顯微鏡的解析度。以油代替空氣作為光的傳播介質,減少光線的折射或全反射,使觀察到的像更加清晰。

二、 實驗器材

1. 菌落:

大腸桿菌24h營養瓊脂斜面培養物、

金黃色葡萄球菌約24h營養瓊脂斜面培養物、 枯草芽孢桿菌12~18h營養瓊脂斜面培養物。

2. 溶液或試劑:

蒸餾水、碘液、結晶紫染色液、95%酒精、番紅染色液、香柏油。 3. 儀器:

顯微鏡、載玻片、接種環、酒精燈、鑷子、擦鏡紙。

三、 實驗步驟

革蘭氏染色:

1. 塗片

取出載玻片,點燃載玻片,燃盡載玻片上的酒精和滅菌,在中間輕輕點一小滴蒸餾水,用接種環在試管的斜面培養基上,輕輕挑取少量菌體,整個過程試管口都要處在酒精燈的上方,而且速度要快,以防汙染培養基。然後在載玻片的小水滴以轉圈的動作塗片,待水滴混濁後停住,等其乾燥、固定。

2. 初染

滴加結晶紫(以剛好將菌膜覆蓋為宜)於菌落上,染色1~2min ,傾去染色液,有細水從載玻片上方向下衝洗,至洗出液為無色,將載玻片上水甩淨。

3. 媒染

滴加碘液衝去殘水,並覆蓋約1min,水洗。

4. 脫色

將載玻片上面的水甩淨,將載玻片傾斜,在白色背景下,用滴管加95%的酒精脫色,直至流出的酒精剛好不出現藍色,立即用水衝淨酒精,將載玻片上水甩淨。

5. 復染

用番紅液復染約1~2min,水洗,然後再吸水紙吸乾

6. 鏡檢:

在低倍鏡下尋找要觀察的細菌菌落(在不停地移動載玻片,若感覺到有紅色陰影,立刻停止,調整倍數,若不是菌落,繼續找),將鏡筒升高,然後轉換到油鏡。在樣品區域加滴香柏油,用粗調節器將鏡筒小心地降下,使油鏡浸在鏡油中並幾乎與標本相接。將聚光器升至最高位置並開足光圈,用粗調節器將鏡筒徐徐上升,直至視野中出現物像並用細調節器使其清晰準焦為止。

為什麼顯微鏡的物鏡越長,放大倍數越大,目鏡越短,放大倍數越大

4樓:鶴髮童顏

顯微鏡的視角放大率 m=-(s*d)/(fo*fe)

其中fo和fe 分別為物鏡和目鏡的焦距,d為物方焦點到像方焦點的距離,也就是顯微鏡的物鏡越長,放大倍數越大,目鏡越短,放大倍數越大。

擴充套件資料:

物鏡型別:

1、按顯微鏡鏡筒長度(以mm計):透射光用160鏡筒,帶0.17mm厚或更厚的蓋玻片;反射光用190鏡筒,不帶蓋玻片;透射光與反射光用鏡筒,筒長無限大。

2、按浸法特徵:非浸式(乾式)、浸式(油浸、水浸、甘油浸及其它浸法)。

3、按光學裝置:透射式、反射式以及折反射式。

4、按數值孔徑和放大倍數:低倍(n≤0.2與β≤10x),中倍(n≤0.65與β≤40x),高倍(n>0.65與β>40x)。

5、按校正象差的情況不同,通常分為消色差物鏡,半復消色差物鏡,復消色差物鏡,平視場消色差物鏡,平視場復消色差物鏡和單色物鏡。

低倍、高倍、油鏡頭的識別:

1、標明放大倍數10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。

2、低倍鏡最短,高倍鏡較長,油鏡最長。

3、鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。

4、油鏡頭上常刻有黑色環圈,或「油」字。

成像原理:

1、光學顯微鏡

光學顯微鏡主要由目鏡、物鏡、載物臺和反光鏡組成。目鏡和物鏡都是凸透鏡,焦距不同。物鏡的凸透鏡焦距小於目鏡的凸透鏡的焦距。物鏡相當於投影儀的鏡頭,物體通過物鏡成倒立、放大的實像。

目鏡相當於普通的放大鏡,該實像又通過目鏡成正立、放大的虛像。經顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。反光鏡用來反射,照亮被觀察的物體。

反光鏡一般有兩個反射面:一個是平面鏡,在光線較強時使用;一個是凹面鏡,在光線較弱時使用,可會聚光線。

2、電子顯微鏡:

電子顯微鏡是根據電子光學原理,用電子束和電子透鏡代替光束和光學透鏡,使物質的細微結構在非常高的放大倍數下成像的儀器。

電子顯微鏡的分辨能力以它所能分辨的相鄰兩點的最小間距來表示。20世紀70年代,透射式電子顯微鏡的解析度約為0.3奈米(人眼的分辨本領約為0.1毫米)。

現在電子顯微鏡最大放大倍率超過300萬倍,而光學顯微鏡的最大放大倍率約為2000倍,所以通過電子顯微鏡就能直接觀察到某些重金屬的原子和晶體中排列整齊的原子點陣。

5樓:匿名使用者

1、顯微鏡目鏡

越長,放大倍數越小

目鏡是放大虛像,目鏡越長,也就是離虛像越近,故放大倍數越小2、物鏡越長,放大倍數越大,距裝片距離越近物鏡是放大實像,物鏡越長,也就是離實物越近,「物近像遠大」,故放大倍數越大

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