1樓：唐三鏡鍾仕金
為了賦予工業釀酒酵母對澱粉和纖維素的降解活性,提高釀酒酵母對粗木薯粉進行酒精發酵時的酒精產率;另一方面,為了解決工業釀酒酵母不適於使用營養缺陷型篩選標記對轉化.
標記質粒及原理是什麼
2樓：天蠍小葉子
his，myc，ha一般不叫標記，而稱為標籤，特點是方便純化和檢測。his原核載體很多都
有，myc、專ha還有flag都是真核屬常用的表達標籤，如pcmv5-myc/flag/ha，有些為了提高檢測的特異性和靈敏度，會特殊改造3×flag或者3×ha等。
原核表達載體和真核表達載體的區別
3樓：威海博銳化機
一、表達載體不同：
原核表達載體構建重組表達載體：
1、載體酶切：將表達質粒用限制性內切酶（同引物的酶切位點）進行雙酶切，酶切產物行瓊脂糖電泳後，用膠**kit或凍融法**載體大片段。
2、pcr產物雙酶切後**，在t4dna連線酶作用下連線入載體。
真核細胞表達載體之一為pegfp-n1載體，具有對方面的優點。pegfp-n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。
二、表達實現方式不同：
真核表達載體具有neo基因，可以採用g418來篩選已成功轉染了該載體的靶細胞。這些特殊的結構可以實現目的基因在靶細胞內的穩定表達。
三、獲得目的基因方式不同：
pegfp-n1載體從結構上看，質粒具有很強的複製能力，可以滿足隨宿主細胞**時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞，這是真核細胞表達載體保證目的基因穩定表達的因素之一。
原核表達載體獲得目的基因：
1、通過pcr方法：以含目的基因的克隆質粒為模板，按基因序列設計一對引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點），pcr迴圈獲得所需基因片段。
2、通過rt-pcr方法：提取總rna，以mrna為模板，逆轉錄形成cdna第一鏈，以逆轉錄產物為模板進行pcr迴圈獲得產物。
4樓：匿名使用者
原核載體可以將真核基因表達，但是表達出來的蛋白是沒有活性的，因為缺少翻譯後修飾系統。。。真核的表達載體呢 由於比較大 不適合大量快速擴增，所以要在其載體上構建可以在原核生物 如大腸桿菌中複製的所需的複製原件 。。。。綜上 在應用的時候 要構建 穿梭質粒 可以穿梭於 原核和 真核 呵呵 還有就是 原核表達載體的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。
總覺得不夠正確答案 。。。。。有些人緣的蛋白在原核裡沒有蛋白翻譯後修飾，表達後沒有活性，這時候就得在真核裡表......
5樓：匿名使用者
主要是因為原核和真核表達系統所需的表達元件不同。
比如說啟動子，終止子在兩種表達系統中是不一樣的。
帶有真核表達元件的是真核載體，能在真核生物內表達；
帶有原核表達元件的是原核載體，能在原核生物內表達。
兩者都具有的為穿梭載體。
1)真核表達載體和原核表達載體就是能在真核生物或原核生物中表達的載體,它們一般都帶有能在真核生物或原核生物中表達的必需表達元件;
2)真核表達和原核表達的目的都是為了能夠大量獲得自己所需要的目的基因的表達產物,最好有生物活性,以便下一步的實驗需要.
3)原核表達載體一般只能在原核生物中表達外源基因,但有些穿梭載體可以分別在真核和原核生物中表達它們的表達元件.
畢赤酵母的常用載體
6樓：丹鑑攲
典型的巴斯德畢赤酵母表達載體載體包含醇氧化酶－1（aox1）基因的啟動子和轉錄終止子（5'aox1和3'aox1），它們被多克隆位點（mcs）分開，外源基因可以在此插入。此載體還包含組氨醇脫氫酶基因（his4）選擇標記及3'aox1區。當整合型載體轉化受體時，它的5'aox1和3'aox1能與染色體上的同源基因重組，從而使整個載體連同外源基因插入到受體染色體上，外源基因在5'aox1啟動子控制下表達。
畢赤酵母本身不分泌內源蛋白，而外源蛋白的分泌需要具有引導分泌的訊號序列。
而由89個氨基酸組成的釀酒酵母的分泌訊號—α交配因子(α-factor)引導序列已經成功地引導了幾種外源蛋白的分泌。分泌表達載體主要有：ppic9，ppic9k，phil-s1，ppiczα a，pyam75p等。
胞內表達載體主要有：phil-d2，pa0815，ppic3k，ppicz，phwo10，pgapz， pgapza(invitrogen)，ppic3.5k等。
工程菌株y11430，mg1003，gs115 （aox1），km71，smd1168。
畢赤酵母宿主菌常用的有gs115和km71兩種，都具有his4營養缺陷標記。其中，gs115菌株具有aox1基因，是mut+，即甲醇利用正常型；而km71菌株的aox1位點被arg4基因插入，表型為muts，即甲醇利用緩慢型，兩種菌株都適用於一般的酵母轉化方法。
關於基因表達載體模式圖,關於基因表達載體的構建
插入基因狹義來說只是目的基因,而標記基因是用來檢測的,廣義上也是插入的成分 關於基因表達載體的構建 說說它們的作用吧 目的基因就是能夠產生 所需蛋白質的dn 段,比如抗蟲棉就是植入能產生抗蟲蛋白的目的基因。啟動子 終止子 啟動子 終止子是目的基因dna上特殊排序的鹼基。rna從啟動子開始轉錄 翻譯,...
細胞膜上的載體種類都有哪些，細胞膜上的載體種類都有哪些？
細胞膜上的載體種類又載體蛋白和通道蛋白。1 細胞膜主要是由磷脂構成的富有彈性的半透性膜，膜厚7 8nm，對於動物細胞來說，其膜外側與外界環境相接觸。其主要功能是選擇性地交換物質，吸收營養物質，排出代謝廢物，分泌與運輸蛋白質。2 細胞膜是防止細胞外物質自由進入細胞的屏障，它保證了細胞內環境的相對穩定，...
細菌和酵母菌在結構上的區別是，酵母菌與細菌在結構上的區別是 酵母菌 ，細菌 細菌與植物細胞在結構上的區別是 細菌
細菌和酵母菌都有細胞壁與核糖體，此處二者相同。酵母菌是真核生物，有核膜與染色體，而細菌沒有。細菌沒有細胞結構 不屬於生物，只有細胞壁和遺傳物質，遺傳物質散亂地分佈在細胞壁裡 酵母菌是真核生物，有含有染色質的細胞核，由雙層核膜包被，有核糖體 細胞壁 等細胞器。有無成型細胞核。酵母菌是真菌。酵母菌與細菌...