1樓：七夜七次郎
需要表達和研究表達的mrna時
如何獲得cdna？需要哪些步驟？ 5
2樓：匿名使用者
cdna的獲取方法：
1.用親和層析法得到 mrna 後，根據 mrna 分子的 3' 端有 poly (a) 尾結構的原理，用 12~20 個核苷酸長的 oligo 與純化的 mrna 混合， oligo （ dt ）會與 poly (a) 結合作為反轉錄酶的引物，隨機引物法合成的產物也是 rna-dna 的雜交體。把 cdna 克隆到載體中之前，必須把這種雜交體中的 rna 轉變成 dna 鏈，即形成雙鏈 dna 分子。
2.利用 cdna 第一鏈的 3' 末端常常出現髮夾環的特徵，這種髮夾結構是反轉錄酶在第一鏈末端「返折」並且進行復制第一鏈的結果，用這種方法合成的雙鏈 cdna 在一端有一個髮夾環，可以用單鏈特異的 s1 核酸酶切去。新合成的 dna 存在切口，用 dna 連線酶把這些切口連線在一起形成一條完整的 dna 鏈。
rnase h 法優於 s1 核酸酶法，它能獲得包括 mrna 5' 端全部或絕大部分的更長順序 cdna 分子。
cdna簡介：
為具有與某mrna(信使rna)鏈呈互補的鹼基序列的單鏈dna即complementary dna之縮寫，或此dna鏈與具有與之互補的鹼基序列的dna鏈所形成的dna雙鏈。與rna鏈互補的單鏈dna，以其rna為模板，在適當引物的存在下，由依賴rna的dna聚合酶(反轉錄酶)的作用而合成，並且在合成單鏈cdna後，在用鹼處理除去與其對應的rna以後，以單鏈cdna為模板，由依賴dna的dna聚合酶或依賴rna的dna聚合酶的作用合成雙鏈cdna。真核生物的信使rna或其他rna的cdna，在遺傳工程方面廣為應用。
在這種情況下，mrna的cdna，與原來基因的dna(基因組dna，genomic dna)不同而無內含子;相反地對應於在原來基因中沒有的而在mrna存在的3′末端的多a序列等的核苷序列上，與exon序列、先導序列以及後續序列等一起反映出mrna結構。
為什麼真核生物需要構建cdna文庫
3樓：踢
真核生物基因組dna十分龐大,其複雜程度是蛋白質和mrna的100倍左右,而且含有大量的重複序列，採用電泳分離和雜交的方法，都難以直接分離到目的基因，其中還含有內含子等無用的序列。這是從染色體dna為出發材料直接克隆目的基因的一個主要困難.
高等生物一般具有105種左右不同的基因,但在一定時間階段的單個細胞或個體中,都盡有15%左右的基因得以表達,產生約15000種不同的mrna分子。cdna文庫是通過rna反轉錄得來的，由mrna出發的cdna克隆,其複雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多.
構建部分基因文庫為什麼要用cdna而不用dna 基因組文庫用dna還是rna
4樓：德基廣場
部分基因組文庫是rna逆轉錄來的，它只包含了生物的可轉錄的部分dna，即cdna，所以構建這個只要用cdna就行。
基因組文庫包含了生物的全部dna，應該用所有的dna來構建。
西南大學 什麼是cdna文庫，如何構建
5樓：匿名使用者
國家211工程重點大學，師範類專業相當不錯。當然在211裡算是不上檔次的大學，一本，國家重點院校。
6樓：匿名使用者
西南大學是教育部直屬師範類院校之一，是211大學，只是名氣不大，在西南很多人不知道但是還是有實力的大學
7樓：武雲霞上的青菜
教育學綜合考試參考書目1、《中國教育史》，孫培青，2、《外國教育史》，王天一3、《教育研究方法》，**全主編，西南師範大學出版社2023年版。4、《教育學原理》，葉瀾著，5、《現代教育學》，靳玉樂主編，四川教育出版社，2023年版。6、《教育概論》，靳玉樂主編，重慶出版社，2023年版。
7、《教育學概論》，**全，西南師範大學出版社，2023年版。8、《德育原理》，易連雲，武漢大學出版社，2023年版。檢視原帖》
dna和cdna有什麼區別如題
8樓：諾辰歸
樓上說法沒錯 但沒說出其區別。
對於真核生物的基因來說，直接從染色體上來的基因片段（dna）一般比從mrna來的基因片段（cdna）要長。因為mrna在後成熟過程中 剪下掉了內含子，留下的cdna都是有效的氨基酸決定序列（外顯子）。
如果你把真核生物的基因放在原核生物中表達 一定要用cdna作基因 而不能用原始的dna,因為原核生物不能剪下掉內含子。
簡單回答 拋磚引玉 相信你會理解
cdna文庫必須滿足什麼條件?其構建包括哪些步驟?
9樓：鵬飛
條件：1 、要使用mrna經過反轉錄pcr產生cdna。
2 、要進一步獲得cdna全長
3 、加適當接頭，連線到適當的載體內。
4 、轉化受體細胞，構建為cdna文庫。
基本步驟包括：rna 的提取(例如異硫氰酸胍法，鹽酸胍—有機溶劑法，熱酚法等等，提取方法的選擇主要根據不同的樣品而定)，要構建一個高質量的cdna 文庫，獲得高質量的mrna 是至關重要的，所以處理mrna 樣品時必須仔細小心。由於rna 酶存在所有的生物中，並且能抵抗諸如煮沸這樣的物理環境，因此建立一個無rna 酶的環境對於製備優質rna很重要。
在獲得高質量的mrna 後用反轉錄酶oligo(dt) 引導下合成cdna 第1鏈，cdna 第2鏈的合成(用rna酶h和大腸桿菌dna 聚合酶i，同時包括使用t4噬菌體多核苷酸酶和大腸桿菌dna連線酶進行的修復反應)，合成接頭的加入、將雙鏈dna克隆到載體中去、分析cdna插入片斷。擴增cdna 文庫、對建立的cdna文庫進行鑑定。這裡強調的是對載體的選擇，常規用的是λ 噬菌體，這是因為λ dna 兩端具有由12個核苷酸的粘性末端，可用來構建柯斯質粒，這種質粒能容納大片段的外源dna。
cdna文庫的構建所用的酶有哪些
10樓：閃亮登場
反轉錄酶：以mrna為模板反轉錄合成dna。
限制性內切酶：酶切目的基因和載體，使其產生相同的粘性末端。
dna連線酶：連線目的基因和載體。
11樓：匿名使用者
反轉錄酶，限制性核酸內切酶，dna連線酶
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