1樓：張家界瑞美
關鍵是要看你擴的片段有多長？一般擴的話用一對引物可以擴出1k多的片段。而用一個引物去測序的話一次只能測出600—700左右，而如果你擴的片段較長的話只用一條引物就沒法測通，可能就需要一對或者是更多的引物去測序了！
???兩對引物擴增？？？lz說的什麼意思？擴增後怎麼拼接呀？？又沒有序列！
一般擴增用一對引物就行了，然後在根據你擴出來片段的大小絕定要用幾條引物進行測序！如果片段在1k左右需要2條引物測通！
同時這2條用於測序的引物可以是擴增的引物，但並不是所以pcr引物都能用於測序，以下這些pcr引物不適合用作測序的：簡併引物、隨機引物，如rapd引物、過長的引物（一般測序引物在18-24個鹼基）、有特殊標記的引物、不純的引物！
但是如果你的片段太長的話就需要更多的引物才能測通了！
2樓：匿名使用者
rating實際上是軟體本身通過二聚體、錯配、本身二級結構等情況和結合能為引物的好壞的一個「打分」。打分計算公式在「引數」選項中可以看到（就是ratingparameters）。原則上打分越高，引物的質量越好。
多條條帶是出現了非特異性擴增。一般是引物在模板上出現錯配造成的。引物二聚體大小一般出現在100~150bp的位置。
如何設計巢氏PCR的第一對引物，為什麼設計PCR引物時，後面那條引物設計出來後要反轉？
可以使用primer5 或者primerdesign設計 還是主要考慮髮夾結構，gc含量，tm值和引物交叉，還有減少引物二聚體的產生。如果是擴增啟動子的話，建議選擇引物的長度30 35bp，一般試劑盒裡有接頭引物的，只要在下游已知序列設計引物就可以咯 巢式pcr nested pcr 是指利用兩套p...
幫忙設計一對情侶網名
瀙噯 佬厷厷 瀙噯 佬嘙嘙 為什麼要帶符號呢，帶符號的不一定很好 男 豬是念來過倒 女 倒過來念是豬 男 趴在牆頭等紅杏 女 紅杏翻過牆頭來 男 13579 女 24680 許不起的承諾 給不起的溫柔 做我的天 是我的海 懷念過去 忘記過去 殘留的餘溫 殘餘的殘溫 最終還是沵 陪我到最後 不要你離開...
誰可以幫我設計一對情侶名字
小新 沒蠟筆 丸子 沒櫻桃 老黑丶 老白丶 我說我愛你,我說我要 寂寞 硪陪伱 寂寞 誰陪硪 凝眸 望 抬眸 羞 迎眸 吻 回眸 驚 我不夠優秀，我不夠溫柔，敗犬男生 敗犬女生 俄 醉了醉le 俄 美了美le 貪戀文旳 冷 貪戀鑫旳 傲 恐龍 怪獸 莫名其妙的空。措手不及的疼。無奈的孤獨 孤獨的無奈...