1樓:匿名使用者
細胞增值的檢驗方法:brdu標記法1、細胞以1.5*105/ml細胞數接種於直徑35ml培養
皿中,培養一天,用含0.4%fcs培養液同步化三天,使絕大多數細胞處於go期。2、終止細胞培養前,加入brdu,37℃孵育40min。
3、棄培養液,波片用pbs洗滌3次。4、甲醇/醋酸固定10min。5、經固定的波片空氣乾燥,0.
3%h2o2-甲醇30min滅活內源性氧化酶。6、5%正常兔血清封閉。7、甲醯胺100℃,5min變性核酸。
8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠細胞增值的檢驗方法:brdu標記法1、細胞以1.5*105/ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中,培養一天,用含0.
4%fcs培養液同步化三天,使絕大多數細胞處於go期。2、終止細胞培養前,加入brdu,37℃孵育40min。3、棄培養液,波片用pbs洗滌3次。
4、甲醇/醋酸固定10min。5、經固定的波片空氣乾燥,0.3%h2o2-甲醇30min滅活內源性氧化酶。
6、5%正常兔血清封閉。7、甲醯胺100℃,5min變性核酸。8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠brdu單抗,陰性對照加pbs或血清。
9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細,數,計算標記指數。rdu單抗,陰性對照加pbs或血清。9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細,數,計算標記指數。
2樓:匿名使用者
你要先在fsc和ssc散點圖上gate出細胞,然後ssc-w和ssc-hgate出單細胞,然後在用brdu/pi 散點圖開啟才能開的比較清楚的圖。
3樓:匿名使用者
你將來要出生的孩子,可能會同時具有以下四種特點:
(1)龍鳳胎。(2)兒子。(3)天才。(4)健康。
一、現在因為種種原因,要求你放棄其中一項,你劃掉那個?
二、現在要求你在剩餘的三項種劃掉一項,你劃掉哪個?
三、現在要求你在剩餘的兩項種選擇屬於你的一項,你選擇哪一個?
4樓:手機使用者
可能生活環境和受教育程度不同,所以很多觀念和想法不同,這種事情也不能一邊倒的去看,畢竟很多系列我們也不太清楚!只要讓自己站在更高的位置,看更遠的地方!很多事情也就有了答案!
5樓:匿名使用者
過情人節了沒什麼好說的
6樓:曉韓
壓低不能洗澡,血壓低的人群對於水溫很敏感,水溫過高,就會導致低血壓人群的血管出現擴張,然後會慢慢感覺自己的大腦出現眩暈狀態,有時候甚至突然倒地不起,對於老年人來說,如果這種情況後果是非常大的。2.體質差不能洗澡,對於那些體質本來就比較差的人來說,如果洗個冷水澡,那可真受折磨了,因為體質差的人遇冷容易受到刺激,有時候會出現感冒、發燒等問題,但是,也並不是說體質差的人就不可以碰冷水,日常的冷水洗臉、洗腳還是可以的,但是千萬別洗澡。
7樓:匿名使用者
wifixiajdhfnbkjshbsx
8樓:匿名使用者
企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。
為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.
5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。
根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。
企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。
為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.
5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。
9樓:匿名使用者
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流式細胞週期結果 怎麼分析
10樓:匿名使用者
細胞週期至少有兩種做法,最常見的如下圖分析:
這個是brdu和7-aad方法檢測細胞週期。紅色的gate就是g1期,綠色的就是s期,橙色的就是g2/m期。brdu, pi, 或者edu方法和這個一樣分析
如果單用pi等dna染料染色,需要專業軟體來分析計算了。
比如這個圖,是dna染料單染,其中粉色部分是g1期,黃色部分是s期,綠色部分是g2/m期。中間的分佈一般是通過flowjo這樣的軟體計算自動生成的。
用流式細胞儀檢測細胞週期,觀察哪些指標可以反應增殖,觀察哪些指標可以反應阻滯? 10
11樓:匿名使用者
你這個試驗bai必須要用
dubrdu加pi來檢測。pause-chase抑制**,zhi如果dao是抑制了最後一步,就會回出現g2期的堆積,g1期減少。如果抑制的答是dna合成,就會出現brdu陽性細胞的減少
促進的藥物會發現各個時間點細胞週期的有變化。你最好貼個圖我給你分析一下
流式細胞儀測定細胞週期各時相的原理和基本步驟(不用說具體使用的量)
12樓:匿名使用者
在細胞培養液中加入模擬核苷酸edu (比較老的方法也可以用brdu)。培養一小時 後,更換為正常的培養液繼續培養。模擬核苷酸可以像天然核苷酸一樣被細胞攝取並整合入新合成的dna。
培養一段時間後(一般小於一個細胞週期),固定細胞。根據所使用模擬核苷酸的不同,使用不同的方法。edu,改變緩衝液的ph值,就會發出熒光。
而brdu則需用熒光抗體識別,需要對細胞膜和核膜進行通透處理。
再加入pi對dna染色。
在二維座標圖上,橫座標設為線性pi熒光強度,縱座標設為模擬核苷酸的熒光強度(log)。
典型的圖就像下面一樣:
g1, g2 和s期就按照圖中的劃分來做。g1期的細胞沒有新合成dna,所以brdu訊號是陰性,而pi的訊號位於1倍體期。s期是正在合成dna,所以brdu都是陽性。
g2期是已經合成好了2倍的dna,所以位於2倍體期,訊號是g1期的一倍。這個圖中,g1 pi訊號是300, g2就是600.
流式細胞儀檢測細胞週期DNA含量結果圖怎樣分析和說明
流式細胞儀檢測細胞週期dna含量結果圖怎樣分析和說明已經做完流式,看到結果卻不知該怎樣分析了。我用的是annexinv fitc 凋亡試劑盒 annexinv pi雙染檢測細胞凋亡。請教各位,凋亡散點圖中第1,2,4象限到底分別代表什麼細胞?手裡的資料說法都不相同。試劑盒說明書 1代表細胞收集過程中...
關於細胞週期
確是b只有能 的細胞才有細胞週期。不 的細胞不具有細胞週期。常見的有細胞週期細胞 莖的形成層細節細胞 根尖分生區的細胞 莖尖生長點的細胞。人 生髮層的細胞 受精卵等。a c d細胞已經分化 b沒有分化 就那麼簡單 只有b具有 能力.故它有周期 其它三個是高度分化的,不能再 故沒有細胞週期 具有細胞週...
高中生物歸納 哪些細胞具有細胞週期
造血幹細胞,腫瘤幹細胞,表皮與胃腸粘膜上皮的幹細胞。這類細胞始終保持活躍的 能力,連續進入細胞週期迴圈,所以具有細胞週期。細胞週期指從一次細胞 形成子細胞開始到下一次細胞 形成子細胞為止所經歷的過程。在這一過程中,細胞的遺傳物質複製並均等地分配給兩個子細胞。細胞週期內有兩個階段最為重要 g1到s和g...