1樓:mxx米小夕
western 內參用的gapdh分子量為146kd,檢測條帶大
約在36kd,b-actin分子量為42kd。
嚴謹的western blot實驗設計中要內求有良好的參容照體系,這對實驗結果分析是非常有用。要用western blot比較不同條件下或者不同組織中,目的蛋白表達量的相對多少,前提條件是等量的細胞上樣,才有比較的基礎。特別表達量不高時,上樣量的差別就很可能影響結果的分析。
因此需要內參很重要。
2樓:匿名使用者
常用的蛋白內參抄有 beta actin 和 gapdh,它們是有區別的
gapdh分子量為146kd,檢測條帶大約在36kd,beta actin分子量為42kd。一般選擇內參與要檢測的目的蛋白的分子量最好相差5kd以上
另外,細胞總蛋白的western blot的內參蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的western blot一般用gapdh為內參
內參gapdh,b-actin有什麼區別嗎
3樓:皮蛋憨子粥
gapdh和b-actin的區別:
1、定義不同:
gapdh:gapdh或g3pdh是甘油醛-3-磷酸脫氫酶。
b-actin:即「肌動蛋白」,是細專胞的一種重要骨架蛋白。
2、分佈屬方式不同:
gapdh:廣泛分佈於各種組織中的細胞。
b-actin:分佈在骨架當中。
3、作用不同:
gapdh:被廣泛用作抽提total rna,poly(a)+ rna,western blot等實驗操作的標準化的內參。
b-actin:β-actin是pcr常用的內參,β-actin抗體是western blot很好的內參指數。
4、結構不同:
gapdh結構:
b-actin結構:
5、應用不同:
gapdh:蛋白印跡法和內參。
b-actin:
生物化學與分子生物學;氨基酸、多肽與蛋白質;細胞生物學。
4樓:匿名使用者
常用的蛋白內參有 beta actin 和 gapdh,它們是有區別的
gapdh分子量為146kd,檢測條帶大約在36kd,beta actin分子量為42kd。一般選擇回內參與要檢測的目的蛋白的分答子量最好相差5kd以上
另外,細胞總蛋白的western blot的內參蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的western blot一般用gapdh為內參
western blot 的內參不一致,急求助
western blot 內參 actin 是43還是45 kda
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