gus染色原理,gus染色原理

2021-09-04 05:43:40 字數 931 閱讀 1749

1樓:匿名使用者

這是由其初始產物經氧化二聚作用形成的靛藍染料,它使具gus活性的部位或位點呈現藍色,用肉眼或在顯微鏡下可看到,且在一定程度下根據染色深淺可反映出gus活性。

因此利用該方法可觀察到外源基因在特定器官、組織,甚至單個細胞內的表達情況。

根據gus基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法最高)。其中最為常用的是組織化學法。

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gus基因存在於e.coli等一些細菌基因組內,編碼β-葡萄糖苷酸酶。β-葡萄糖苷酸酶是一個水解酶,以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物,其反應產物可用多種方法檢測出來。

由於絕大多數植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被廣泛應用於基因調控的研究中。其中組織化學法檢測以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸(x-gluc)作為反應底物,將被檢材料用含有底物的緩衝液浸泡。若組織細胞發生了gus基因的轉化,並表達出gus,在適宜的條件下,該酶就可將x-gluc水解生成藍色產物。

2樓:匿名使用者

β- d - 葡糖醛酸酶(gus基因編碼)是從大腸桿菌k- 12 菌株分離出的一種酸性水解酶,能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質的水解。其中很多水解產物具有髮色團或形成熒光物質,採用某種β-葡萄糖苷酶作底物,其反應產物可用分光光度,熒光和組織化學的方法檢測。其中組織化學法是催化的底物是x-gluc,產物為藍色化合物,該方法可觀察到外源基因在特定器官,組織,甚至單個細胞內的表達情況。

gus組織化學染色檢測轉基因植物實驗中為什麼有的植株完全沒有藍色,其染色體組成是什麼?

3樓:匿名使用者

gus基因編碼b-葡萄糖甘酶,它是一種水解酶,能水解x-gluc成藍色。所以含gus基因的通過gus染色就有藍色,而沒有該基因的就不會有藍色。

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