1樓:南京金益柏生物科技****
由於nf-kb採用免疫熒光檢測可能會出現非特異性結合,一般轉核觀察nf-kb採用熒光效果欠佳,建議是否考慮採用鐳射共聚焦檢測,其效果要比前者好多了。供參考。
求助免疫熒光pi染核問題
2樓:南京金益柏生物科技****
細胞試驗指南上dapi染核是在孵育完二抗之後,估計pi也可以在這時加。在論壇中查到的濃度不一,有10-50μm,有5ug~20ug/ml,作用時間有5-30min不等,染完後pbs洗3遍,封片。用535 nm激發波長,615 nm發射波長觀察細胞。
具體用哪一種合適估計得自己試了。
細胞免疫熒光,求助
3樓:南京金益柏生物科技****
細胞免疫熒光記得先上圖,要不我們也不知道如何幫你啊,對吧
細胞免疫熒光,求助
4樓:南京金益柏生物科技****
細胞爬片免疫熒光實驗步驟
第一天:
1. 在培養板中將已爬好細胞的玻片用pbs浸洗3次,每次3min;
2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, pbs浸洗玻片3次,每次3min;
3. 0.5%triton x-100( pbs配製 )室溫通透20min(細胞膜上表達的抗原省略此步驟);
4. pbs浸洗玻片3次,每次3 min,吸水紙吸乾pbs,在玻片上滴加正常山羊血清,室溫封閉30min;
5. 吸水紙吸掉封閉液,不洗,每張玻片滴加足夠量的稀釋好的一抗並放入溼盒,4°C孵育過夜;
第二天:
6. 加熒光二抗: pbst 浸洗爬片3次,每次3min,吸水紙吸乾爬片上多餘液體後滴加稀釋好的熒光二抗,溼盒中20-37°C孵育1h,pbst浸洗切片3次,每次3min;
注意:從加熒光二抗起,後面所有操作步驟都儘量在較暗處進行。
7. 復染核:滴加dapi避光孵育5min,對標本進行染核,pbst 5min×4次洗去多餘的dapi;
8. 用吸水紙吸乾爬片上的液體,用含抗熒光淬滅劑的封片液封片,然後在熒光顯微鏡下觀察採集影象。
tunel以及免疫熒光同時做的結果,求助
5樓:南京金益柏生物科技****
實驗條件應該沒有問題,表達位置也是對的,加強洗滌降低背景,**拍攝條件優化一下試試看。
求助免疫熒光的結果分析
6樓:南京金益柏生物科技****
可以用image-pro plus分析灰度
免疫熒光封片時的方法和配方,細胞免疫熒光怎麼封片
50 的緩衝甘油,等體積的甘油 等體積的雙蒸水 細胞免疫熒光怎麼封片 細胞bai 免疫熒光的詳細操作du步驟 1,取出細胞爬片zhi放到35mm或60mm用過的細dao胞培養皿裡,pbs洗三遍。注回意有的時候答作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4 多聚甲醛固定20分鐘,pbs洗三遍。...
共定位免疫熒光是什麼，做免疫熒光抗體選擇問題。
免疫熒光可以用於共定位，但也可以用於很多其他應用。共定位不能夠說是免疫熒光的主要用途。一樓回答有助於理解共定位，但是 加上紅色 綠色熒光蛋白的標籤 這種說法並不是免疫熒光的做法。在免疫熒光中，與目標蛋白相結合的是帶有熒光分子基團的抗體，此種抗體雖然發熒光，但不稱為熒光蛋白。另外，共定位不能夠用於證明...
熒光原位雜交與免疫熒光有什麼區別
熒光原位雜交與免疫熒光的區別 原位雜交是從分子水平檢測，免疫熒光是從蛋白水平檢測。免疫熒光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法，使用熒光素標記探針，以檢測探針和 中期的染色體或 間期的染色質的雜交。熒光原位雜交的原理 fish fluorescen...