1樓：糟油酒丸
免疫熒光可以用於共定位，但也可以用於很多其他應用。共定位不能夠說是免疫熒光的主要用途。
一樓回答有助於理解共定位，但是「加上紅色/綠色熒光蛋白的標籤」這種說法並不是免疫熒光的做法。在免疫熒光中，與目標蛋白相結合的是帶有熒光分子基團的抗體，此種抗體雖然發熒光，但不稱為熒光蛋白。
另外，共定位不能夠用於證明相互作用，更不可能證明蛋白之間的共價結合。
共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白a和b都在此細胞有表達，並且在同樣的細胞內位置/細胞器。
就好像你用***看到，有兩個人a和b此時都在某市同一家咖啡廳內，並不能夠證明他們在幽會。但是如果說因為同時在一處這個事實而懷疑有姦情，也並不全是毫無道理，只是需要別的手段來證明罷了。
2樓：匿名使用者
共定位是說明兩個蛋白存在直接或間接相互作用的細胞學佐證（只是佐證，不是直接證據）。
如果蛋白a本身是定位於細胞內的x細胞器，而與蛋白b同時表達的時候蛋白a跟蛋白b一起定位到了y細胞器，那麼說明蛋白a和蛋白b是共定位的，也就是這兩個蛋白可能存在相互作用（只是可能）。
請選擇上面的推薦答案，是對的，回答的時候有些大意，沒看到「免疫」二字，這裡糾正一下之前的回答~~~
共聚焦顯微鏡可以先顯示轉染進去的綠色熒光，再顯示熒光二抗麼
3樓：
（62616964757a686964616fe4b893e5b19e313333633764311） 利用有色熒光蛋白標記技術進行蛋白定位研究
此法也可稱為活細胞定位.把兩種具有相互作用的蛋白分別克隆到帶有兩種不同顏色熒光
蛋白（綠色熒光蛋白或紅色熒光蛋白）的載體中,共轉染到功能細胞中（一般選用 cos7 細胞）表達帶有熒光的融合蛋白.這樣,相互作用的兩種蛋白就被標上不同的熒光,可以在細胞內用熒光顯微鏡直接觀測.在進行精確細胞定位或共定位時,必須用共聚焦熒光顯微鏡觀測.
因為共聚焦熒光顯微鏡（相當於給病人診斷的 ct）觀測的是細胞內一個切面上的顏色.如果在一個切面上在同一區域看到兩種顏色,就提示這兩種蛋白在該區域內有相互作用.普通熒光顯微鏡看到的是一個立體圖象,無法確定蛋白質共定位現象.
在進行定位或共定位同時,也可以對細胞核進行染色.這樣,在細胞中就有三種顏色.細胞核的顯色幫助你確定共定位發生的位置.
上面介紹的活細胞定位,其優點是表達的熒光蛋白熒光強,沒有背景,觀測方便.但缺點
是相互作用的蛋白由於標上熒光蛋白,實際上是兩個融合蛋白.融合蛋白的定位結果或共定位結果是否與天然蛋白分佈一致,有待於進一步確定.而利用免疫熒游標記技術可以避免這一缺點.
（2） 利用雙色或多色染色的免疫熒光技術進行蛋白定位研究
免疫熒光的原理是,首先把細胞進行固定,然後用待檢測靶蛋白的抗體（一抗）與細胞內
靶蛋白進行免疫反應,再用熒光素（如 fitc 和 tritc 等）標記的二抗與一抗進行反應.這樣就在細胞內形成免疫複合物（靶蛋白----一抗---二抗）,結果靶蛋白被標上顏色,然後可用共聚焦熒光顯微鏡觀測定位與共定位結果.
免疫熒光技術最大優點就是可用來檢測細胞內源性蛋白的定位及相互作用.當然也可以對
靶細胞進行轉染表達目的蛋白,然後標記目的蛋白進行觀測.免疫熒光技術的缺點是熒光相對較弱並且背景較高,結果受到干擾,所以這項技術不好掌握.為了結果的可靠性,要求嚴格設計陽性對照與陰性對照.
（3） 細胞內蛋白動態定位
有時細胞在正常狀態下,有相互作用的蛋白在胞內可能暫時分開,沒有共定位現象發生.
但是在某一個特定情況下,如細胞受到外界刺激時,細胞本身會產生應急反應,這時暫時分離的蛋白有可能發生相互作用,併產生共定位現象.所以在進行共定位研究時,可根據具體情況具體分析,必要時觀測細胞內蛋白動態定位結果.
共定位(免疫熒光)是什麼？
4樓：糟油酒丸
免疫熒光可以bai用於共定位du，但也可以用於很zhi多其他應用。共定dao位不能夠說是免疫專熒光的主要用途。
一樓回答有屬助於理解共定位，但是「加上紅色/綠色熒光蛋白的標籤」這種說法並不是免疫熒光的做法。在免疫熒光中，與目標蛋白相結合的是帶有熒光分子基團的抗體，此種抗體雖然發熒光，但不稱為熒光蛋白。
另外，共定位不能夠用於證明相互作用，更不可能證明蛋白之間的共價結合。
共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白a和b都在此細胞有表達，並且在同樣的細胞內位置/細胞器。
就好像你用***看到，有兩個人a和b此時都在某市同一家咖啡廳內，並不能夠證明他們在幽會。但是如果說因為同時在一處這個事實而懷疑有姦情，也並不全是毫無道理，只是需要別的手段來證明罷了。
5樓：糟油酒丸
免疫熒copy光可以用於共定位，但也可以用於很多其他應用。共定位不能夠說是免疫熒光
的主要用途。
一樓回答有助於理解共定位，但是「加上紅色/綠色熒光蛋白的標籤」這種說法並不是免疫熒光的做法。在免疫熒光中，與目標蛋白相結合的是帶有熒光分子基團的抗體，此種抗體雖然發熒光，但不稱為熒光蛋白。
另外，共定位不能夠用於證明相互作用，更不可能證明蛋白之間的共價結合。
共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白a和b都在此細胞有表達，並且在同樣的細胞內位置/細胞器。
就好像你用***看到，有兩個人a和b此時都在某市同一家咖啡廳內，並不能夠證明他們在幽會。但是如果說因為同時在一處這個事實而懷疑有姦情，也並不全是毫無道理，只是需要別的手段來證明罷了。
6樓：du知道君
免疫熒光可以用於共定位，但也可以用於很多其他應用。共定位不能專夠說是免疫熒光的主要用途。屬 一樓回答有助於理解共定位，但是「加上紅色/綠色熒光蛋白的標籤」這種說法並不是免疫熒光的做法。
在免疫熒光中，與目標蛋白相結合的是帶有熒光分子基團的抗體，此種抗體雖然發熒光，但不稱為熒光蛋白。 另外，共定位不能夠用於證明相互作用，更不可能證明蛋白之間的共價結合。 共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白a和b都在此細胞有表達，並且在同樣的細胞內位置/細胞器。
就好像你用***看到，有兩個人a和b此時都在某市同一家咖啡廳內，並不能夠證明他們在幽會。但是如果說因為同時在一處這個事實而懷疑有姦情，也並不全是毫無道理，只是需要別的手段來證明罷了。
做免疫熒光抗體選擇問題。
7樓：匿名使用者
這個貌似挺困難的。。。
自己做一抗
或者別家公司去看看
或者給病毒組分帶上不同熒游標記，就是重組病毒了。。。
你要用什麼儀器觀察病毒呢？
是直接看病毒，還是看病毒組分在細胞、動物、植物中的定位？
繼續求助免疫熒光檢測,繼續求助免疫熒光檢測NF
由於nf kb採用免疫熒光檢測可能會出現非特異性結合,一般轉核觀察nf kb採用熒光效果欠佳,建議是否考慮採用鐳射共聚焦檢測,其效果要比前者好多了。供參考。求助免疫熒光pi染核問題 細胞試驗指南上dapi染核是在孵育完二抗之後,估計pi也可以在這時加。在論壇中查到的濃度不一,有10 50 m,有5u...
免疫熒光封片時的方法和配方,細胞免疫熒光怎麼封片
50 的緩衝甘油,等體積的甘油 等體積的雙蒸水 細胞免疫熒光怎麼封片 細胞bai 免疫熒光的詳細操作du步驟 1,取出細胞爬片zhi放到35mm或60mm用過的細dao胞培養皿裡,pbs洗三遍。注回意有的時候答作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4 多聚甲醛固定20分鐘,pbs洗三遍。...
熒光原位雜交與免疫熒光有什麼區別
熒光原位雜交與免疫熒光的區別 原位雜交是從分子水平檢測，免疫熒光是從蛋白水平檢測。免疫熒光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法，使用熒光素標記探針，以檢測探針和 中期的染色體或 間期的染色質的雜交。熒光原位雜交的原理 fish fluorescen...