提取DNA為什麼需在鹼性條件下

2021-03-03 22:01:57 字數 1426 閱讀 4531

1樓:北京索萊寶科技****

提取dna需要bai在鹼性條件下du的原因如下:

在酸性條zhi件下,dna容易被水dao解,但最不穩定是的嘌專呤與脫氧核糖之間的糖苷屬鍵.在鹼性條件下,rna由於2'-oh的存在,比dna要容易水解得多,dna在鹼性條件下相對穩定.

dna提取方法:

酚抽提法:先用蛋酶k、sds破碎細胞,消化蛋白,然後用酚和酚-氯dna大小為100-150kb

甲醯胺解聚法:破碎細胞同上,然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與dna的結合,再透析獲得dna可得dna200kb左右。

玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪於乙醇上,然後用帶鉤或u型玻璃棒在介面輕攪,dna沉澱液繞於玻棒。生成dna約80kb。

異丙醇沉澱法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子rna(在異丙醇中可溶狀態)

表面活性劑快速製備法:用triton x-100a或np40表面活性劑破碎細胞,然後用蛋白酶k或酚去除蛋白,乙醇沉澱或透析。

加熱法快速製備:加熱96°C-100°C,五分鐘,然後離心後取上清,可用於pcr反應。

鹼變性快速製備:先用naoh作用20分鐘,再加hci中和,離心後取上清,含少量dna。

提取dna為什麼需在鹼性條件下

2樓:北京索萊寶科技****

提取dna需要抄在鹼性條件下的原因如下:

在酸性條件下,dna容易被水解,但最不穩定是的嘌呤與脫氧核糖之間的糖苷鍵.在鹼性條件下,rna由於2'-oh的存在,比dna要容易水解得多,dna在鹼性條件下相對穩定.

dna提取方法:

酚抽提法:先用蛋酶k、sds破碎細胞,消化蛋白,然後用酚和酚-氯dna大小為100-150kb

甲醯胺解聚法:破碎細胞同上,然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與dna的結合,再透析獲得dna可得dna200kb左右。

玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪於乙醇上,然後用帶鉤或u型玻璃棒在介面輕攪,dna沉澱液繞於玻棒。生成dna約80kb。

異丙醇沉澱法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子rna(在異丙醇中可溶狀態)

表面活性劑快速製備法:用triton x-100a或np40表面活性劑破碎細胞,然後用蛋白酶k或酚去除蛋白,乙醇沉澱或透析。

加熱法快速製備:加熱96°C-100°C,五分鐘,然後離心後取上清,可用於pcr反應。

鹼變性快速製備:先用naoh作用20分鐘,再加hci中和,離心後取上清,含少量dna。

3樓:匿名使用者

在酸性條復

件下,dna和rna都容易被制水解,但最不穩定是的嘌呤與脫氧核糖之間的糖苷鍵。所以rna的酸穩定性好稍微好一點。

在鹼性條件下,rna由於2'-oh的存在,比dna要容易水解,dna在鹼性條件下相對穩定。

所以提dna選擇在鹼性條件下。佳學基因為你解答。

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