1樓：匿名使用者
不同的限制酶切割的序列不同，因此如果用一種切割會造成兩種目的基因粘性末端相同，無法區分開來。再者，限制酶還不能破壞標記基因。
2樓：匿名使用者
因為不同的限制性內切酶會主動識別不同的切點，不同的切點處在不同的鹼基處。所以用兩種內切酶會產生兩種不同的粘性末端。
550為您回答。^_^
3樓：匿名使用者
因為每種限制性內切沒都有具體的酶切位點，酶切位點就是鹼基所在的位置，切的地方不一樣當然目得到的目的基因不一樣，至於酶為什麼會在選擇性剪下這裡面的問題就更值得學習了
為什麼用兩種限制酶切有兩種不同的目的基因（產生兩種
4樓：匿名使用者
為什麼用兩種限來制酶切有兩種不同的源
目的基因
用a、baib兩種酶切出du目的基因來，可以zhi防止自環。然後dao
再用a、b酶去切質粒，也可防自環，且得到與目的基因互補的黏性末端，才能連線目的基因。所以，既要用兩種不同酶切，還要保證質粒和目的基因一樣的兩種酶。兩種不同的限制性內切酶識別並切割的序列是不同的,也就是兩種酶分別切割了基因和載體時,產生了兩個切口,這兩個切口不是粘性末端,不能互補配對,所以不可能連線在一起,如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端,這樣基因本身除了切下來的那段之外,剩下的部分在連線酶作用下相同的粘性末端就會配對連線,同樣載體也會繼續連線成環,基因和載體連在一一起也有,而且首尾的順序也有兩種,連線體系跑電泳結果會有4個條帶,至少是4種,而且就算那個連線後的片段大小符合你要求的那段純化後也有一部分是不能表達的.
哪四種就不用寫了,你肯定知道的,不能表達的那部分就是順序不對的,這就是同種酶切連線的缺陷性.
在構建基因表達載體時，常用兩種不同的限制酶切割目的基因和質粒，獲得不同的粘性末端，其主要目的是
5樓：匿名使用者
（1）用限制酶切割dna後，可能產生黏性末端，也可能產生平口末端．若要在限制酶基因工程中，往往採用同種限制酶切割目的基因和質粒以產生相同的黏性末端，再用dna連線酶使其直接進行連線．（2）rna聚合酶識別和結合的部位是啟動子．將目的基因導
為什麼用限制酶切割目的基因時候需要使用兩種以上不同的限制酶進行切割？
6樓：假面
為了防止
抄目的基因和運載體自身環襲化。為保證bai目的基因正序插入du運載體，防止zhi反向連線。
限制性核酸內
dao切酶是可以識別並附著特定的脫氧核苷酸序列，並對每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶。
7樓：匿名使用者
為了防止目的基因和運載體自身環化。
為保證目的基因正序插入運載體，防止反向連線。
8樓：樹葉兒的幻想
這個問題好，兩種當然不會環化了，注意每種酶切後，的「切口」都不一樣啊！
對你有益請採納！
9樓：匿名使用者
是怕切下來的片段自己環化
為何基因工程中，載體和目的基因要用同一種限制酶切割。？既然這樣，那為什麼為了防止粘性末端亂連線，要
10樓：匿名使用者
什麼時候要用兩種限制酶切了？把目的基因與載體切好後，聚合，會有目的-目的、載體-載體、目的-載體的基因，要的是目的載體的那一部分，然後就需要標記基因了
11樓：獨上江樓
目的基因和載體要用同一種限制性核酸內切酶切割，不然就沒法連了。用不同的限制酶切兩端，防止載體自連或目的基因自連。
基因工程裡，用兩種不同的限制酶一起切割質粒和含目的基因的dna，可以防止質粒和目的基因自身環化，那
12樓：棄療的梅大鳥
取下一段目的基因要切兩次，也就是說這裡切的兩次可以
分兩種不同的酶來切，同回樣的，載體也需要切兩次同樣也答是用這兩種酶來切，這樣有兩組鹼基的互補配對，就可以避免載體和載體配對以及目的基因和目的基因配對。（不太確定啊。。。。。）
13樓：
限制性內切bai酶識別特定的酶切位點，
du作zhi用於dna分子鏈上磷酸二酯dao鍵，同種限制酶才回能切割出相同的粘性答末端。連線時，相同的粘性末端通過鹼基互補配對，在dna連線酶的作用下形成磷酸二酯鍵。基因工程的主要步驟：
1、目的基因的獲得；2、目的基因與表達載體的連線；3、表達載體向宿主的轉化。
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