1樓:匿名使用者
因為原核生物缺乏翻譯後的修飾,所以表達的真核蛋白和真核中表達有所差異內,可能沒容有生物學活性等,但是要是做免疫原應該沒問題;
基因需為cdna,不能含有內含子,原核細胞不能對mrna進行剪下;
要分析dna序列資訊,分析其密碼子,由於原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時可能會出現稀有密碼子而影響表達的情況;
要注意你要表達蛋白的大小問題,一般情況下大於70kd的蛋白在原核菌種不容易表達或表大量低;
原核表達出來的一般是包涵體,所以蛋白的復性很關鍵,否則表達出來了也不能用,沒有活性。
原核生物中表達真核蛋白應該注意什麼問題
2樓:匿名使用者
因為原核生物缺乏復翻譯後的制修飾,所以表達的真核蛋白和真核中表達有所差異,可能沒有生物學活性等,但是要是做免疫原應該沒問題;
基因需為cdna,不能含有內含子,原核細胞不能對mrna進行剪下;
要分析dna序列資訊,分析其密碼子,由於原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時可能會出現稀有密碼子而影響表達的情況;
要注意你要表達蛋白的大小問題,一般情況下大於70kd的蛋白在原核菌種不容易表達或表大量低;
原核表達出來的一般是包涵體,所以蛋白的復性很關鍵,否則表達出來了也不能用,沒有活性。
原核表達,為什麼空載表達的很好,目的蛋白沒有表達,可能的原因有什麼?
3樓:匿名使用者
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
4樓:
目的蛋白的訊號肽是否被宿主識別?
原核表達蛋白降解問題 20
5樓:匿名使用者
iptg induction and his-tag protein purification?
問學長姊比較快
做蛋白的原核表達時為什麼總是不穩定,明明上次已經有表達了,現在又老做不出來?
6樓:匿名使用者
這個很正常,我也碰到過,有時候是找不出原因的,只能再轉化,設定重新開始,篩選穩定的了。
7樓:匿名使用者
有的時候菌株也會有影響的
求助:原核表達目的蛋白胞內發生降解
8樓:匿名使用者
應該是原核表達宿主菌比較準確 原核表達宿主菌之前可以表達蛋白,放一段時間不表達蛋白原因很多 首先要確認其他條件是否也有改變,比如其他基因,質粒載體,表達條件等等 原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化,被汙染等等,結果。能抑制多長時間你需要自己檢測。不同細胞、不同sirna、不同轉染試劑都會影響效率。
但是假設你轉染之後48小時或者72小時之後passage 細胞做mtt或者克隆形成實驗,個人覺得是可以的(前提是你有48小時或72小時knockdown證據)。
真核表達載體與染色體能整合嗎，原核表達載體和真核表達載體的區別
不是整個重組載bai 體都跟染色體du整合。目的基因是否zhi整合到 dao染色體上，要看你是內怎麼設計這個質粒容的。如果質粒上目的基因的兩端有與染色體上相同的同源序列，就可以整合到染色體上。如果沒有同源序列 的話，就沒法整合到染色體上。在酵母細胞中，有時候也可以轉一個質粒進去表達蛋白，不整合到染色...
原核表達中基因突變怎麼預防
一個基因 1 operon操縱子 一個或幾個結構基因與一個調節基因和一個操縱基因,加上啟動子構成一個操縱單元,這個單元稱為操縱子。在操縱子中,結構基因產生mrna並作為模板合成蛋白質 而調節基因則產生一種阻遏蛋白與操縱基因相互作用 阻遏蛋白與操縱基因結合從而阻礙了結構基因轉錄成為mrna 在誘導過程...
真核原核基因表達差異論述級別的題目！救命啊
原核生物沒有內含子，dna複製和轉錄相對較容易也比較簡單，調控幾乎完全由基因上游的rna聚合酶結合位點控制 而真核生物由於內含子的存在，有了 可變剪接 的可能，內含子也可以調控部分dna合成的問題，比如針對環境變化調整轉錄出的蛋白質的結構 組成等 另外，真核原核生物的核糖體也是不一樣的，其中蛋白質和...