1樓：匿名使用者
用專門的試劑盒來做吧，然後按照說明書操作，挺方便的。我們實驗室以前用的biog熒光定量pcr試劑盒，反應挺靈敏的，實驗結果也不錯，而且染料法和探針法都有。
2樓：匿名使用者
可以用引物設計軟體，primer5就挺不錯的。你是要檢測dna還是rna？探針法檢測dna的話可以用biog super probe kit，檢測rna的話可以用biog super prob one step kit。
普通pcr引物設計和熒光定量pcr引物設計的區別
3樓：匿名使用者
一、方法不同
來1、普自通pcr引物設計：引物的優劣直接關係到pcr的特異性與成功與否。
2、熒光定量pcr引物設計：通過熒光染料或熒游標記的特異性探針，標記跟蹤pcr產物進行實時監測反應，利用與之相適應的軟體對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度
二、原理不同
1、普通pcr引物設計：為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板dna序列。
2、熒光定量pcr引物設計：在pcr反應體系中加入熒光基團，通過熒光訊號不斷累積而實現實時監測pcr全程，然後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在實時熒光定量pcr中，對全程pcr擴增過程進行實時檢測，根據反應時間和熒光訊號的變化可以繪製成一條曲線。
三、注意事項不同
1、普通pcr引物設計：引物應用核酸系列保守區內設計並具有特異性。產物不能形成二級結構。引物長度在15~30鹼基之間。
2、熒光定量pcr引物設計：實時熒光定量 pcr 儀應安放在溼度較低、灰塵較少、遠離水池的平穩檯面上，不能有強光直射，室內應通風良好，無腐蝕性氣體
4樓：南京金益柏生物科技****
實時定量bai的引物設計du要求比較高，可
以按zhi普通引物設計的方法來做，dao但是回設計時要注意擴增的片段答不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
5樓：
實時定量的引物抄
設計要求比較高，可以按普通bai引物設計的方法來做，但du是設計時要注zhi意擴增的片段dao不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
6樓：
建議來你還是選擇cds區不一自樣的地方設計bai引物吧，這樣可以避免du交叉汙染引起zhi的非特異擴增，dao擴增的序列長度不一定要一樣，每個引物你最好設計兩三對，然後做一個相對定量看看不同引物的擴增效率，選擇比較好的兩對引物做後續試驗，內參基因的引物不需...
7樓：
nf-kbmrna不就是nf-kb的mrna麼 做定量pcr就是測它mrna的表達量啊 nf-kbp65是nf-kb3 nf-kbp52是nf-kb2 所以這兩個還是有區別的 如果你是要檢測65的話
如何提高熒光定量PCR靈敏度,熒光定量pcr檢測的靈敏度怎麼確定
設計特異性極高的引物是關鍵 用於反轉錄的rna質量也是很重要的一方面。熒光定量pcr檢測的靈敏度怎麼確定 靈敏度即最低檢測限,如果你定了某個濃度為最低檢測濃度,那麼將其重複20次實驗,至少有17次以上應該陽性的。靈敏度的定義是 能夠與零相區分的最小檢測濃度。什麼是實時熒光定量pcr?有什麼作用?請詳...
熒光定量PCR報告單怎麼看，如何看熒光定量PCR檢驗報告單
ct dna檢測結果 copies ml 6.06乘以10的8次方 是指在你那取的樣本檢測出6.06乘以版10的8次方個拷貝每毫升的權衣原體濃度 uu dna 檢測結果 copies ml 9.55乘以10的5次方 是指在你那取的樣本檢測出9.55乘以10的5次方個拷貝每毫升的支原體濃度 而檢測下限...
如何計算熒光定量pcr標準曲線,怎麼判斷實時熒光定量PCR標準曲線是否準確
標曲中y軸一般是標準品或者未知樣品的ct值,x軸一般是標準品的初始量值,或者初始量值的對數。怎麼判斷實時熒光定量pcr標準曲線是否準確 看標準曲線是否反映出了標準物質的真實濃度 我要用ct法做熒光定量pcr,請問需要做標準曲線嗎 最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.調cdna就還了 怎麼判斷實時熒光...